【摘 要】
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本试验建立了一种快速检测鸡传染性支气管炎病毒的通用性PCR方法.通过对纯化后IBV核蛋白基因进行的直接PCR及套式PCR扩增表明,两次PCR产物的大小为0.7kb和0.5kb,与实际设计相
【机 构】
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中国农业科学院,哈尔滨兽医研究所,兽医生物技术国家重点实验室,黑龙江,哈尔滨,150001大连市畜牧兽医技术服务中心;大连三仪生物工程研究所;沈阳农业大学畜牧畜医学院;吉林省畜禽总公司;东北农业大学动
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本试验建立了一种快速检测鸡传染性支气管炎病毒的通用性PCR方法.通过对纯化后IBV核蛋白基因进行的直接PCR及套式PCR扩增表明,两次PCR产物的大小为0.7kb和0.5kb,与实际设计相符.而对照的NDV及IBDV的PCR扩增产物均为阴性.用IBV HB(华北)株感染SPF鸡后,应用我们所建立的PCR方法去检测不同时期所采集的肾脏、气管、盲肠扁桃体、肺脏和肝脏中的IBV,在SPF鸡感染IBV后的21天仍然能够检测到IBV的基因组,Southern blot杂交试验证明了我们获得的PCR产物为IBV的核蛋白基因.对30份自然感染病料的检测表明,本实验所建立的PCR方法检测阳性数为15份,阳性率为50%(15/30);鸡胚接种检测的阳性数为17份,阳性率为56.7%(17/30);IFA检测的阳性数为11份,阳性率为36.7%(11/30).PVR检测法与鸡胚接种方法的阳性符合率为93.3%(14/15),统计学分析表明,P＞0.05,差异不显著,而PCR检测法与IFA的阳性符合率为60%(9/15).结果证明本实验所建立的PCR检测方法具有敏感、特异、快速等特点,适用于不同来源及不同血清型IBV的检测.
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