【摘 要】
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根据GenBank登录的猪流行性腹泻病毒（PEDV）毒株（登录号KJ960180）的M基因保守序列，设计1对扩增片段大小为299 bp的特异性引物，经PCR扩增、克隆、测序鉴定后，提取质粒作为阳性标准品，建
【机 构】
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安徽省农业科学院畜牧兽医研究所,安徽农业大学动物科技学院
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根据GenBank登录的猪流行性腹泻病毒（PEDV）毒株（登录号KJ960180）的M基因保守序列，设计1对扩增片段大小为299 bp的特异性引物，经PCR扩增、克隆、测序鉴定后，提取质粒作为阳性标准品，建立了PEDV的SYBR GreenⅠ荧光定量RT-PCR检测方法。该方法在1.21×103～1.21×108拷贝/μL范围内呈现良好的线性，相关系数（R2）为0.999，扩增效率为99%，扩增产物的熔解曲线为单个特异峰，产物Tm值为85.5～86℃，最低检测限为1.21×101拷贝/μL。本研究建立的SYBR GreenⅠ实时荧光定量RT-PCR检测方法特异性强、重复性好、成本低且操作简单，适用于PEDV的早期诊断、定量研究和流行病学监测。
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