【摘 要】
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目的研究纳米氧化锌(ZnO NPs)对SH-SY5Y人神经细胞的毒性作用及其可能的分子机制。方法 MTT法检测ZnO NPs对SH-SY5Y细胞存活率的影响;TUNEL法检测ZnO NPs对SH-SY5Y细胞的形态
【机 构】
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武汉市第一医院风湿免疫科,同济大学生命科学与技术学院,马应龙药业集团股份有限公司,淮海工学院化学工程学院,武汉市新洲区中医院
【基金项目】
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中国博士后基金（No 2013531221）,连云港市科技局农业攻关项目（No NY1007）
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目的研究纳米氧化锌(ZnO NPs)对SH-SY5Y人神经细胞的毒性作用及其可能的分子机制。方法 MTT法检测ZnO NPs对SH-SY5Y细胞存活率的影响;TUNEL法检测ZnO NPs对SH-SY5Y细胞的形态学影响;流式细胞术观察ZnO NPs对SH-SY5Y细胞周期的影响及凋亡诱导作用;Real-time PCR检测凋亡相关基因Bcl-2、Bax、Survivin的mRNA水平变化;Western blot测定Bcl-2、Bax、Survivin及Cyto-C的蛋白表达并进行光密度定量。结果 ZnO NPs显示出对SHSY5Y的细胞毒性,呈现浓度依赖性;15 mg·L-1ZnO NPs作用后,TUNEL检测呈阳性反应;与未处理组相比,SH-SY5Y细胞中细胞周期阻滞于G1期并产生凋亡(P<0.05);抗凋亡基因Bcl-2、Survivin的mRNA水平和蛋白水平下调(P<0.05),促凋亡蛋白Bax的mRNA水平和蛋白水平上调,同时细胞Cyto-C的蛋白表达上调(P<0.05)。结论 ZnO NP下调SH-SY5Y的细胞存活率,诱导细胞周期阻滞和凋亡产生,显示出对神经细胞的毒性损伤作用,其机制与激活线粒体凋亡通路及抑制Survivin的转录和表达有关。
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