猪α干扰素在毕赤酵母中的高效表达和纯化

来源 :浙江农业学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户：mosalin

【摘要】

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为了研制新型的猪用抗病毒制剂,开展了猪α干扰素（PoIFNα）在毕赤酵母中的表达和产物纯化研究。将PCR扩增的PoIFNα基因插入pPIC9k的SnaBⅠ和EcoRⅠ位点,构建了表达转移载体pPI

【作者】

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张存叶伟成王一成袁秀芳刘蔓雯张燕

【机构】

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浙江省农业科学院畜牧兽医研究所

【出处】

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浙江农业学报

【发表日期】

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2010年1期

【关键词】

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猪Α干扰素毕赤酵母分泌表达 porcine interferon-alpha Pichia pasteris secreted expression

【基金项目】

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浙江省科技项目（2005C22034）

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为了研制新型的猪用抗病毒制剂,开展了猪α干扰素（PoIFNα）在毕赤酵母中的表达和产物纯化研究。将PCR扩增的PoIFNα基因插入pPIC9k的SnaBⅠ和EcoRⅠ位点,构建了表达转移载体pPIC9k/PoIFNα;经酶切和测序鉴定,转移载体构建正确。pPIC9k/PoIFNα以限制性内切酶SalⅠ线性化后电转化毕赤酵母GS115菌株,经抗性筛选获得4拷贝PoIFNα基因的重组菌株GS115/PoIFNα;重组菌株经BMMY培养基诱导后上清中有目的蛋白,表达量达136mg/L。表达产物经过SP-Seph

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