慢性氟中毒大鼠大脑胆碱能毒蕈碱受体的表达

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目的

观察慢性氟中毒大鼠大脑胆碱能毒蕈碱受体(muscarinic acetylcholine receptor,mAChR,简称M受体)mRNA和蛋白表达,探讨其在慢性氟中毒性脑损伤及学习记忆能力降低发生机制中的作用。

方法

选择健康SD大鼠60只,采用随机数字表法按体质量分为2组:对照组和染氟组,每组30只,雌雄各半。对照组大鼠自由饮用自来水(含氟量< 0.5 mg/L);染氟组饮用氟化钠和自来水配制溶液(含氟量为50.0 mg/L),2组大鼠均饲以标准饲料(含氟量为6.2 mg/kg)。实验10个月后,用Morris水迷宫方法检测大鼠行为学变化(代表学习能力的逃避潜伏期时间和代表记忆能力的空间探索次数);应用实时荧光定量PCR和蛋白质印迹法检测大鼠大脑组织M受体亚型M1、M3的mRNA及蛋白表达;分析学习记忆能力与M1、M3受体蛋白表达的相关关系。

结果

染氟组大鼠逃避潜伏期时间[(21.68±2.90)s]较对照组[(6.14±1.71) s]延长(t= 0.289,P< 0.05);空间探索次数[(11.62±2.26)次]较对照组[(19.00±3.69)次]降低(t= 0.352,P< 0.05)。染氟组大鼠大脑组织M1、M3受体mRNA表达[(17.07±6.89)%、(12.25 ± 5.03)%]及蛋白表达[(71.07±6.89)%、(32.25±4.66)%]均低于对照组[(100.00±3.00)%、(100.00±2.15)%和(100.00±9.01)%、(100.00±10.33)%,t= 0.210、0.157、0.095、0.296,P均< 0.05]。相关分析结果显示,大鼠逃避潜伏期时间与M1、M3蛋白表达呈负相关关系(r=- 0.683、- 0.700,P均< 0.05),空间探索次数与M1、M3蛋白表达呈正相关关系(r= 0.867、0.837,P均< 0.05)。

结论

慢性氟中毒大鼠大脑组织M受体mRNA及蛋白表达水平降低,可能是氟中毒大鼠学习记忆能力降低的机制之一。

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