【摘 要】
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为了建立可绝对定量狂犬病病毒（RABV）的微滴式数字PCR（ddPCR）检测方法，本试验根据RABV基因组起始区域设计引物和探针，继而优化引物和探针浓度以及退火温度，并对建立的ddPCR方法的灵敏度、特异性和重复性进行分析。结果显示：ddPCR方法的最佳引物和探针浓度分别为900 nmol/L和250 nmol/L,最佳退火温度为55℃;ddPCR方法的标准曲线相关系数（R~2）为0.999,呈现
【基金项目】
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上海市“科技创新行动计划”技术标准项目（20DZ2200200）；
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为了建立可绝对定量狂犬病病毒（RABV）的微滴式数字PCR（ddPCR）检测方法，本试验根据RABV基因组起始区域设计引物和探针，继而优化引物和探针浓度以及退火温度，并对建立的ddPCR方法的灵敏度、特异性和重复性进行分析。结果显示：ddPCR方法的最佳引物和探针浓度分别为900 nmol/L和250 nmol/L,最佳退火温度为55℃;ddPCR方法的标准曲线相关系数（R~2）为0.999,呈现良好的线性关系；灵敏度高，最低可检测到3.37 copies/μL;特异性良好，与常见犬病原无交叉反应；重复性好，检测结果稳定。临床样品的检测结果显示，本试验建立的狂犬病病毒ddPCR方法与实时荧光定量反转录PCR（RT-PCR）方法的符合率为100%。结果表明，本试验建立的狂犬病病毒微滴式数字PCR方法灵敏度高、特异性强，可用于狂犬病病毒的绝对定量检测。
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