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研究脂质堆积诱发骨骼肌线粒体功能异常过程中,腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)激动剂对骨骼肌过氧化物酶体增殖物受体γ共激活因子1α(PGC1α)、线粒体融合蛋白2(Mfn2)、核呼吸因子1(NRF1)表达的影响。
方法采用反转录聚合酶链式反应(RT-PCR)和免疫印迹(Western blotting)检测软脂酸干预下成肌细胞C2C12骨骼肌细胞PGC1α、Mfn2和NRF1表达水平。Western blotting检测哪种AMPK激动剂(AICAR、罗格列酮、二甲双胍)激活PGC1α作用最强及对骨骼肌细胞Mfn2和NRF1表达水平的影响,PGC1α激动剂上调和特异性小干扰RNA下调骨骼肌细胞PGC1α表达对Mfn2和NRF1的影响。
结果软脂酸引起骨骼肌细胞PGC1α、Mfn2和NRF1表达水平下降(P<0.05)。无论有无软脂酸存在,AICAR、罗格列酮、二甲双胍均能上调PGC1α表达,其中AICAR效果最明显(P<0.05)。AICAR能逆转软脂酸诱发的骨骼肌细胞PGC1α、Mfn2和NRF1表达下降。Mfn2和NRF1蛋白表达水平随PGC1α表达水平增加而增加,表达水平下降而下降。
结论AICAR能够缓解软脂酸对骨骼肌细胞PGC1α、Mfn2和NRF1表达的不利影响,并且可能通过增强PGC1α表达上调Mfn2和NRF1表达。