红细胞预处理对小鼠脾组织P物质蛋白条带表达的影响

来源 :新乡医学院学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户:guiminzhu18
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目的针对蛋白质印迹技术难以检测常规方法处理后的脾组织中的P物质(SP)蛋白,探讨更佳的脾组织处理方法。方法小鼠颈椎脱臼处死,取脑组织测质量后进行粉碎,离心弃上清液,按照1∶10(W∶V)的比例加入细胞组织快速放射免疫沉淀裂解液和蛋白酶抑制剂混合物,裂解30 min后进行提取。脾组织蛋白按照以下3种方法进行提取:(1)采取与脑组织蛋白提取方法一致的常规方法进行提取;(2)脾组织预先采用胶原酶Ⅰ进行消化,用红细胞裂解液裂解和Hank’s液洗涤处理后再进行蛋白提取;(3)脾组织不进行Hank’s液洗涤,其他步骤
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