有关影响常规病理制片质量几个问题的探讨

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  doi:10.3969/j.issn.1007-614x.2010.02.135
  
  标本的收取
  
  病理科工作人员收验标本时,必须严格执行查对制度,若发现疑问时,应立即向送检方提出并在申请单上注明情况。验收标本人员不得对申请单中临床医师填写的各项内容进行改动。
  
  组织固定
  
  组织固定的好坏是影响制片质量的关键因素。但在实际工作中,由于临床手术标本体积大,组织表面黏附的血液和黏液又没有及时清除,而实质性脏器的肿瘤多数位于脏器中央,再加上固定液量不足不能完全覆盖组织,造成组织固定不佳。现介绍两种增强标本固定的方法:①用20%福尔马林液作增强固定液,原理是利用加强和增加固定液的浓度来增强固定液的渗入。方法是将固定液倒入烧杯中放入恒温水浴锅预热至60℃,将取好材的标本浸没在烧杯中30分后取出,再进行下一操作环节。②利用微波对组织产生热效应而充分固定的目的,方法是将固定液倒入烧杯中,将取好材的标本浸没在烧杯中,将烧杯置于微波炉中4分钟,杯中固定液的温度在50~55℃,然后将其取出,转入下一操作环节。
  
  按时更换脱水剂和透明剂
  
  组织脱水不彻底透明不够,直接影响切片染色和观察。最常用的脱水剂为乙醇,浓度由低到高,逐步置换出组织内的水分。组织脱水时间的长短可根据组织块的大小、厚薄和温度高低而定,对于含水分较多的脑组织、纤维结缔组织和皮肤组织等应适当延长固定时间。最后病理组织经过无水乙醇脱水进入二甲苯透明时,应尽量甩干架子上的乙醇。透明多采用二甲苯溶液,在透明过程中,必须注意掌握好时间。总之,要做到透明适当,就必须在操作过程中多观察,一旦发现组织呈透明状时,表明组织内已完全无水,应转入下一操作环节。
  
  组织的浸蜡和包埋石蜡的选择
  
  浸蜡多采用纯净而熔点稍低的石蜡。病理组织经过透明后要尽量吸去其表面的二甲苯然后进行浸蜡,以免组织浸蜡不充分造成切片出现裂痕。浸蜡时间依据病理组织块大小厚薄而定,一般为1~3小时,浸蜡时恒温箱的温度应比所用石蜡熔点稍高,以保持石蜡恰在熔溶状态 使病理组织取得良好的浸蜡效果。熔蜡应及时过滤、更换。
  包埋石蜡的选择是否恰当直接影响切片质量。包埋用的石蜡应纯净、熔点适宜。最好选用市售专用切片石蜡。包埋石蜡的温度要比组织稍高2~4℃,应<65℃;包埋的动作要迅速敏捷,尽量把组织最大、最平切面或所需的病灶切面向下。皮肤、肠管、黏膜组织必须垂直包埋;包埋用的镊子不可加温过高,以免烫伤组织。
  
  染色液及染色
  
  苏木精-伊红染色液是使用最广泛的普通染液,用其染色也是病理工作中最基本的染色方法。目前几乎所有的常规组织形态学观察和描述都是基于苏木精-伊红染色法,该法能较好地显示组织结构和细胞形态。
  
  切片的封固
  
  用事先配好的中性树胶封固切片。配制中性树胶时加入二甲苯的量要适中,不能过稠或过稀,太稠封片时易产生气泡,太稀又易外溢,有碍美观。封固时,当切片中二甲苯挥发后,应重新放入到二甲苯中透明。封好切片后在玻片左侧贴上编好号码的标签。
  
  病理技术人员的要求
  
  切片质量低劣会让病理医师难以做出正确诊断。故病理技术人员在操作过程中,必须认真做到以下几点:①严格按照规章制度操作,不得任意更改操作规程;②在切片制备流程的每一环节上反复核对,防范差错;③每批片子完成后,对照切片质量评判标准,进行自我质量检查,发现不合格的片子不能交诊断医师,必须重新切片;④熟悉制片过程各环节的基本原理,刻苦钻研业务技术,技术精湛;⑤具有高度的法律意识,认真做好病理文字记录,保管好检材的石蜡包埋组织块和原切片等实物资料,必要的图像资料和大体标本等。
  
  病理科技术基础设施保障
  
  一张制作优良的切片既需要技术人员精湛的技术和精心操作, 同时也离不开性能优越的仪器设备。病理科必备的基础设施有:自动脱水机、切片机、漂片机、恒温箱等。较高层次的设备还应有超薄切片机、冰冻切片机、电子图像存储仪等。
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