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目的建立血清标本经聚合酶链反应(PCR)扩增乙型肝炎病毒(HBV)全长基因的新方法,并初步进行克隆分析,从而为HBV分子生物学及致病机理研究奠定基础。方法针对位于整个HBV基因序列中的两个缺口区设计含酶切位点的引物,扩增3.2kbHBV全长DNA,经酶切及连接后克隆入PUC18载体。结果用PCR方法成功获得了3.2kbHBVDNA,经Sal Ⅰ酶切克隆人PUC18载体,获得重组质粒PUC18/HBV3.2,酶切鉴定和PCR扩增证实重组质粒中含有3.2kbHBV全长DNA,成功构建了HBV全基因克隆。结论成