探讨重组人色素上皮衍生因子（rhPEDF）对HaCaT细胞体外增殖和白细胞介素6 （IL-6）、IL-8及血管内皮生长因子（VEGF）表达的影响。
方法HaCaT细胞分4组进行不同处理，分别为100 μg/L rhPEDF组、50 μg/L rhPEDF组、25 μg/L rhPEDF组及对照组（只加RPMI 1640培养液）。采用CCK8法检测不同浓度rhPEDF作用于HaCaT细胞24、48、72 h后对细胞体外增殖的影响。RT-PCR和Western印迹法检测rhPEDF对HaCaT细胞IL-6、IL-8、VEGF mRNA及其蛋白表达的影响。统计分析方法采用两因素方差分析、单因素方差分析、SNK-q检验以及Pearson相关分析。
结果25、50、100 μg/L的rhPEDF作用24、48、72 h后对HaCaT细胞体外增殖均有不同程度的抑制作用。随时间延长和rhPEDF浓度的增加，rhPEDF对HaCaT细胞体外增殖的抑制作用均逐渐增强（F=1115、329.9，均P< 0.001）。与对照组相比，不同浓度（100、50、25 μg/L）rhPEDF作用于HaCaT细胞48 h后，VEGF、IL-6、IL-8 mRNA及蛋白的表达均下降，差异均有统计学意义（P< 0.05）。随rhPEDF浓度的增加，各浓度rhPEDF组VEGF mRNA、IL-6和IL-8蛋白表达均出现下调，与对照组比较，差异均有统计学意义（P< 0.05）；100 μg/L rhPEDF组的IL-6、IL-8 mRNA表达明显低于25 μg/L rhPEDF组（P< 0.05）；100 μg/L rhPEDF组VEGF蛋白表达分别低于50、25 μg/L rhPEDF组（P< 0.05），而50与25 μg/L rhPEDF组间差异无统计学意义（P> 0.05）。
结论rhPEDF可抑制HaCaT细胞体外增殖，并可在mRNA及蛋白水平下调IL-6、IL-8、VEGF的表达。