【摘 要】
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目的：制备抗草丁膦bar基因的原核表达系统和多克隆抗体。方法：以常规基因重组技术,将bar基因片段插入原核表达载体pET28,得到重组质粒pET28-bar,经酶切、测序鉴定正确后,用该重
【机 构】
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郑州大学细胞生物学研究室、郑州大学生物工程系,河南省职业病防治研究所毒理科
【基金项目】
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科技部国际科技合作基金资助项目2007DFA01240,国家自然科学基金资助项目30700014
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目的：制备抗草丁膦bar基因的原核表达系统和多克隆抗体。方法：以常规基因重组技术,将bar基因片段插入原核表达载体pET28,得到重组质粒pET28-bar,经酶切、测序鉴定正确后,用该重组质粒转化大肠杆菌BL21（DE3）,IPTG诱导后进行SDS-PAGE电泳,镍柱亲和纯化目的蛋白,以目的蛋白免疫BALB/c小鼠,ELISA和Western blot法检测抗体的效价和特异性。结果：bar基因在大肠杆菌BL21（DE3）中得到高效表达,占总蛋白的39.2%。以高纯度的目标蛋白作为抗原免疫小鼠,得到抗PA
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