【摘 要】
:
通过改进鼠肠道微生物基因组DNA提取方法以期更全面地反映鼠肠道菌群的真实情况。采用CTAB和SDS结合的方法裂解细胞,同时改进了传统的酚/氯仿抽提方法,提取全过程控制在2 h以
【机 构】
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中国农业大学食品科学与营养工程学院,农业部转基因产品检验监督测试中心
【基金项目】
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国家高技术研究发展计划863项目(2006AA10Z440);国家自然科学基金项目(2007-Z8)
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通过改进鼠肠道微生物基因组DNA提取方法以期更全面地反映鼠肠道菌群的真实情况。采用CTAB和SDS结合的方法裂解细胞,同时改进了传统的酚/氯仿抽提方法,提取全过程控制在2 h以内。通过紫外分光光度计,细菌通用引物PCR,总菌群实时定量PCR,变性梯度凝胶电泳(DGGE)对改进方法及两种试剂盒法提取DNA的结果进行比较,评价了所建立的高效提取方法。与试剂盒相比,改进的方法DNA得率较高,简便快速,成本低廉。同时后续的PCR鉴定及DGGE菌群多样性分析显示,改进的方法可以更好地揭示鼠肠道菌群分布和特性。
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