【摘 要】
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目的 研究血竭散对克罗恩病大鼠结肠组织自噬和炎症小体的影响,探讨其治疗克罗恩病的作用机制.方法 采用2,4,6-三硝基苯磺酸诱导复制克罗恩病大鼠模型.模型复制后,将36只大鼠随机分为空白组,模型组,血竭散低、中、高剂量组和柳氮磺砒啶(sulfasalazine,SASP)组,每组6只.苏木精-伊红染色法观察大鼠结肠组织病理学改变,酶联免疫吸附法检测结肠组织中炎症细胞因子表达水平,实时荧光定量PCR法检测Beclin1、NOD样受体家族含pyrin结构域蛋白3(NOD-like receptor famil
【机 构】
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苏州市中西医结合医院,江苏 苏州 215000;南京中医药大学附属苏州市中医医院,江苏 苏州 215000
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目的 研究血竭散对克罗恩病大鼠结肠组织自噬和炎症小体的影响,探讨其治疗克罗恩病的作用机制.方法 采用2,4,6-三硝基苯磺酸诱导复制克罗恩病大鼠模型.模型复制后,将36只大鼠随机分为空白组,模型组,血竭散低、中、高剂量组和柳氮磺砒啶(sulfasalazine,SASP)组,每组6只.苏木精-伊红染色法观察大鼠结肠组织病理学改变,酶联免疫吸附法检测结肠组织中炎症细胞因子表达水平,实时荧光定量PCR法检测Beclin1、NOD样受体家族含pyrin结构域蛋白3(NOD-like receptor family pyrin domain containing 3,NLRP3)和黑素瘤缺乏因子2(absent in melanoma 2,AIM2)mRNA表达水平,蛋白免疫印迹法检测哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mammali-an target of rapamycin,mTOR)、p-mTOR、Beclin1、NLRP3、AIM2、含Caspase募集结构域的凋亡相关斑点样蛋白(apoptosis-associated speck-like protein containing a Caspase recruitment do-main,ASC)和Caspase-1蛋白表达水平,免疫荧光法检测微管相关蛋白轻链3β(microtubule-asso-ciated protein light chain 3 beta,LC3B)表达水平.结果 与模型组比较,血竭散和SASP干预后大鼠结肠组织病理学评分,白细胞介素-1β(interleukin-1 beta,IL-1β)、白细胞介素-18(interleukin-18,IL-18)和肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-alpha,TNF-α)表达水平显著降低(P<0.05).与空白组比较,模型组大鼠结肠组织中p-mTOR表达水平显著降低,Beclin1、LC3B、NLRP3、AIM2、ASC和Caspase-1表达水平显著增加(P<0.05).血竭散和SASP干预能上调p-mTOR表达水平,下调Bec-lin1、LC3B、NLRP3、AIM2、ASC和Caspase-1表达水平(P<0.05).结论 血竭散可能通过调控mTOR/Beclin1信号通路抑制肠细胞自噬,减少炎症小体活化,改善克罗恩病大鼠结肠炎.
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