Heymann肾炎RAP全长及氨基端融合蛋白表达载体的构建及表达

来源 :山东医药 | 被引量 : 0次 | 上传用户：skyzbc

【摘要】

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目的构建大鼠Heymann肾炎致病源RAP全长和氨基端多肽原核融合表达载体，表达并纯化融合蛋白。方法采用RT—PCR法获得RAP全长的cDNA，将其与pGEM-T克隆载体连接并转化，筛选阳性克隆

【作者】

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达展云范亚平董海霞施岚施辉陈晓岚

【机构】

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南通大学附属医院

【出处】

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山东医药

【发表日期】

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2009年4期

【关键词】

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目的构建大鼠Heymann肾炎致病源RAP全长和氨基端多肽原核融合表达载体，表达并纯化融合蛋白。方法采用RT—PCR法获得RAP全长的cDNA，将其与pGEM-T克隆载体连接并转化，筛选阳性克隆测序；设计针对RAP全长和氨基端的引物进行PCR扩增，获得相应的DNA。纯化后与PGEX-4T-1载体连接，亚克隆到感受态细菌B121中，经IPTG诱导，表达融合蛋白并纯化，经SDS-PAGE和Western Blot检验。结果酶切分析、PCR及DNA序列测定结果表明成功构建了重组原核表达载体pGEX-4T-1-R

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