探讨川芎嗪对脓毒症致急性肝损伤(SALI)大鼠肝细胞线粒体膜转运功能的保护作用。
方法按随机数字表法将SD大鼠分为假手术组、SALI模型组〔采用盲肠结扎穿孔术(CLP)制模〕、川芎嗪治疗组(CLP术后经尾静脉注入盐酸川芎嗪60 mg/kg)和川芎嗪预防组(CLP术前7 d,每日经尾静脉注射盐酸川芎嗪60 mg/kg),每组12只。各组于术后10 h取腹主动脉血和肝脏,用酶耦联速率法测定血清丙氨酸转氨酶(ALT)、天冬氨酸转氨酶(AST)和线粒体型天冬氨酸转氨酶(m-AST)水平;用比色和化学荧光素法检测肝细胞三磷酸腺苷(ATP)含量;用磷定量化方法检测肝细胞线粒体ATP酶活性;用蛋白质免疫印迹试验(Western Blot)检测肝细胞线粒体膜水通道蛋白8(AQP8)、肉毒碱棕榈酰基转移酶(CPT)的表达。
结果与假手术组相比,SALI模型组、川芎嗪治疗组和川芎嗪预防组血清ALT、AST和m-AST水平显著升高,肝细胞ATP含量显著降低,肝细胞线粒体膜ATP酶活性、AQP8和CPT-1A的表达量明显下降。与SALI模型组相比,川芎嗪治疗组和川芎嗪预防组血清ALT、AST和m-AST水平显著降低〔ALT(U/L):123.8±32.8、105.0±44.5比233.0±110.1,AST(U/L):427.0±117.9、303.9±110.3比742.6±441.4,m-AST(U/L):239.6±64.9、168.2±60.0比412.8±252.6,均P<0.01〕,肝细胞ATP含量均显著升高(nmol/mg:29.5±10.3、34.6±11.2比19.3±8.8,均P<0.01),线粒体膜ATP酶活性也均显著升高〔Na+-K+-ATP酶(U/mg):3.91±0.30、3.97±0.35比2.87±0.82,Mg2+-ATP酶(U/mg):3.75±0.38、3.88±0.35比2.64±1.06,Ca2+-ATP酶(U/mg):3.15±0.58、2.98±0.31比1.75±1.25,Ca2+-Mg2+-ATP酶(U/mg):3.82±0.31、3.91±0.42比2.57±1.01,均P<0.01〕,线粒体膜AQP8和CPT-1A的表达量明显升高〔以假手术组(100%)为参照,AQP8/COX-Ⅳ:(79.12±7.79)%、(88.40±9.22)%比(62.08±11.91)%,CPT-1A/COX-Ⅳ:(87.92±10.06)%、(84.91±17.48)%比(72.11±7.82)%,均P<0.01〕,其中川芎嗪预防组较川芎嗪治疗组血清AST、m-AST水平降低更为显著〔AST(U/L):303.9±110.3比427.0±117.9,m-AST(U/L):168.2±60.0比239.6±64.9,均P<0.05〕。4组间肝细胞线粒体膜CPT-2表达量差异无统计学意义。
结论川芎嗪可以保护SALI大鼠肝细胞线粒体膜转运水、离子和脂肪的功能;川芎嗪对脓毒症的预防作用要优于治疗作用。