【摘 要】
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目的探讨组胺受体4种亚型(H1、H2、H3、H4受体)在小儿尿道横纹肌中和小鼠成肌干细胞C2C12分化过程中的表达。方法收集临床小儿尿道横纹肌标本,石蜡包埋,组织切片,免疫组织化学染色检测H1、H2、H3、H4受体。诱导小鼠成肌干细胞C2C12成肌分化,实时定量聚合酶链反应测量成肌分化早期标志物desmin,中期标志物myogenin,晚期标志物肌球蛋白重链和组胺4种亚型受体mRNA的表达。免疫荧
【机 构】
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450052 郑州大学第一附属医院临床医学重点学科开放实验室 小儿尿动力学中心和泌尿外科,450052 郑州大学第一附属医院临床医学重点学科开放实验室 小儿尿动力学中心和泌尿外科,450052 郑州大
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目的探讨组胺受体4种亚型(H1、H2、H3、H4受体)在小儿尿道横纹肌中和小鼠成肌干细胞C2C12分化过程中的表达。
方法收集临床小儿尿道横纹肌标本,石蜡包埋,组织切片,免疫组织化学染色检测H1、H2、H3、H4受体。诱导小鼠成肌干细胞C2C12成肌分化,实时定量聚合酶链反应测量成肌分化早期标志物desmin,中期标志物myogenin,晚期标志物肌球蛋白重链和组胺4种亚型受体mRNA的表达。免疫荧光染色检测各分化标志物和组胺H3受体蛋白质的表达情况。
结果成肌分化过程中desmin mRNA在分化2、4、6 d后的表达量分别为未分化肌母细胞的12、68、60倍;myogenin mRNA在分化2、4、6 d后的表达量分别为肌母细胞的631、1 408、914倍;肌球蛋白重链mRNA的表达在分化2、4、6 d后,表达量分别为未分化的肌母细胞的7 718、9 448、286 288倍。H1受体mRNA在分化6 d后,表达量约为未分化肌母细胞的25%;H2受体mRNA在未分化肌母细胞与分化各阶段的细胞中的表达均无明显变化(F=1.47,P>0.05);H3受体mRNA在分化2、4、6 d后的表达量是未分化肌母细胞的28、103、198倍;未检测到组胺受体H4受体mRNA的表达。免疫荧光染色发现H3受体蛋白染色随着分化荧光染色强度增加。小儿尿道横纹肌的免疫组织化学染色发现H1、H2、H3受体染色阳性,其中H1受体阳性程度最强,H3受体中度阳性,H2受体弱阳性。
结论小儿尿道横纹肌中和小鼠成肌干细胞分化过程中发现组胺亚型H1、H2、H3受体的表达,H3受体的表达量随着成肌分化过程而增加,预示着其可能在成熟横纹肌细胞中发挥功能。
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