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目的 构建共表达口蹄疫病毒(FWDV)O型P1-2A-IL-18基因和Asia Ⅰ型P1-2A-3C基因的重组鸡痘病毒.方法 将酶切得到的FWDV O型P1-2A-IL-18基因和Asia I型P1-2A-3C基因克隆至鸡痘病毒表达载体pUTAL上,构建重组鸡痘病毒转移质粒pUTAL-P1-2A-3C-P1-2A-IL-18,与鸡痘病毒(FPV)282 E4株共转染鸡胚成纤维细胞(CEF),通过BrdU 3次加压筛选.挑选出单克隆重组病毒株,进行RT-PCR及间接免疫荧光(IFA)鉴定.结果 重组鸡痘病毒转移质粒pUTAL-P1-2A-3C-P1-2A-IL-18经双酶切鉴定证明构建正确.经RT-PCR和IFA鉴定,证明所筛选的重组鸡痘病毒在CEF中能正确表达P1-2A-3C-P1-2A-IL-18基因盒.结论 已成功构建了共表达FMDV O型P1-2A-IL-18基因和Asia Ⅰ型P1-2A-3C基因的重组鸡痘病毒.