Fe304涂层多巴胺修饰PET人工韧带对MC3T3-E1细胞粘附、增殖和分化影响的实验研究

来源 :中国运动医学杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:susili
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目的:观察MC3T3-E1细胞在Fe3O4涂层多巴胺修饰聚对苯二甲酸乙二醇酯(PET)人工韧带材料表面的粘附、增殖及成骨分化情况.方法:按PET材料表面涂层情况分为4组:PET组,即PET表面未处理组;多巴胺(DA)组,即PET表面进行多巴胺涂层组;100 Fe3O4组和200 Fe3O4组,分别为PET经多巴胺处理后表面涂有100μg/ml和200 μg/ml的Fe3O4溶液组.在上述4组PET材料上分别培养MC3T3-E1细胞,进行各项检测.扫描电镜(SEM)和X射线能谱分析(EDS)材料涂层情况.细胞在材料上培养3天和7天后行荧光染色,观察细胞粘附情况.培养1、3、7天后,行CCK-8检测MC3T3-E1细胞的增殖.诱导培养基培养7天检测碱性磷酸酶活性;培养21天行茜素红染色,检测细胞矿化情况;培养14天行Real Time PCR检测骨钙蛋白和胶原Ⅰ基因的表达.结果:SEM和EDS检测验证涂层成功.荧光染色显示涂层组有效增加了细胞的粘附.细胞增殖实验示涂层组对细胞增殖有促进作用,各涂层组与未涂层组差异具有统计学意义(P<0.05).涂层材料组碱性磷酸酶OD值明显高于未涂层组(P<0.05).茜素红染色示各组都有较多矿化结节形成,定量分析显示100 Fe3O4组和200 Fe3O4组与PET组比较差异有统计学意义(P<0.05).PCR检测显示涂层组骨钙蛋白和Ⅰ型胶原基因的表达都较未涂层组增加,骨钙蛋白:Fe3O4组与PET组比较差异有统计学意义(P<0.01);Ⅰ型胶原:DA组、Fe3O4组与PET组比较差异具有统计学意义(P<0.05).结论:经多巴胺修饰四氧化三铁涂层处理的PET人工韧带材料,能明显促进MC3T3-E1细胞的粘附、增殖和分化.
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