【摘 要】
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构建并转染pcDNA3.1-cathepsinB和pSilencer2.1cathepsinB质粒,建立组织蛋白酶B过表达细胞株与基因沉默细胞株,初步探讨组织蛋白酶B对血管平滑肌细胞凋亡的作用.通过RTPCR法扩增获
【机 构】
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南京医科大学附属无锡市人民医院心脏中心
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构建并转染pcDNA3.1-cathepsinB和pSilencer2.1cathepsinB质粒,建立组织蛋白酶B过表达细胞株与基因沉默细胞株,初步探讨组织蛋白酶B对血管平滑肌细胞凋亡的作用.通过RTPCR法扩增获得组织蛋白酶B全基因序列并构建pcDNA3.1cathepsinB表达质粒,同时设计针对组织蛋白酶B靶序列的siRNA,按shRNA表达质粒的克隆策略,设计针对该序列的双链DNA序列并构建pSilencer2.1-cathepsinB质粒,通过脂质体转染人主动脉平滑肌细胞(HA—VsMC),经
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