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摘要[目的]研究合欢皮提取物的抗抑郁作用。[方法]采用小鼠悬尾试验、强迫游泳试验以及利血平所致小鼠抑郁模型试验观察合欢皮提取物的抗抑郁作用。[结果]给小鼠灌胃给予浓度100和300 mg/kg的合欢皮提取物均能缩短小鼠悬尾试验和强迫游泳试验累计不动时间，并能对抗利血平所致小鼠体温下降和眼睑下垂。[结论]合欢皮提取物对小鼠悬尾模型、强迫游泳模型和利血平所致抑郁模型表现出抗抑郁的作用。
关键词 合欢皮（CORTEX ALBIZIAE）；抗抑郁作用；悬尾试验；强迫游泳试验
中图分类号S253文献标识码A文章编号0517-6611（2014）01-00057-02
基金项目四川师范大学校级青年项目（08QNL08）。
作者简介廖颖（1976-），女，四川成都人，副教授，硕士，从事生物医学研究，Email：ying_liao@qq.com。*通讯作者。
收稿日期20130906抑郁症是一种包括多种精神与躯体症状的情感性精神疾病。随着社会的发展，各种应激因素的增加，抑郁症的发病率也在快速的攀升，到2020年可能成为仅次于心脏病的第二大威胁人类健康的疾病[1]。因此，对抑郁症的发病机制及抗抑郁药的研究是当前的重要任务之一。从植物或传统中药中寻找高效低毒的抗抑郁药成为近年来精神类药物研究领域中的新方向。合欢皮（CORTEX ALBIZIAE）是豆科植物合欢（Albzia julibrissin Durazz）的干燥树皮，是一种较为常用的中药，性味甘、平，具有解郁、和血、宁心和消痈肿之功[2]。近年来，一些学者对合欢皮的镇静安神和活血化瘀等功效进行了较多的研究[3-4]，但对其抗抑郁作用的研究鲜有报道。研究采用不同的小鼠抑郁模型对合欢皮的抗抑郁作用进行初步分析，以期为研究合欢皮的进一步开发利用提供依据。
1 材料与方法
1.1 材料
1.1.1 研究对象。合欢皮购于成都同仁堂药店，经鉴定为地道药材（CORTEX ALBIZIAE）。
1.1.2 动物。KM小鼠，雄性，体重18～22 g，由四川省医学科学院试验动物研究所提供，生产许可证号：SCXK（川）2008-24。
1.1.3 主要试剂。利血平，购自广东邦民制药厂有限公司，产品批号：090512；氯丙咪嗪，购自天津药物研究院药业有限责任公司，产品批号：100120；95%乙醇，购自成都市科龙化工试剂厂。
1.2方法
1.2.1 小鼠悬尾试验[5-6]。
1.2.1.1 试验分组。取48只雄性KM小鼠，随机分成4组，每组12只，空白对照组灌胃给予生理盐水，氯丙咪嗪阳性对照组灌胃给予5 mg/kg氯丙咪嗪；合欢皮水提液低、高剂量组分别灌胃给予100和300 mg/kg的药物，末次给药后1 h进行试验。
1.2.1.2 小鼠悬尾试验及不动时间的测定。在上午8：00～12：00进行试验，末次给药1 h后，将小鼠尾部1 cm的部位贴在一水平木板上，头离地5 cm，使动物呈倒挂状态。用挡板隔开动物的视线，动物为克服不正常体位而挣扎活动，但活动一段时间后出现间歇不动状态，显示失望状态，以连续3 s以上的不动时间为有效不动时间；记录6 min内的不动时间。
1.2.2 小鼠强迫游泳试验[7-8]。
1.2.2.1 试验分组。同“1.2.1.1”方法操作。
1.2.2.2 小鼠强迫游泳试验及不动时间的测定。在上午8：00～12：00进行试验，末次给药后1 h，将小鼠分别置于水温（25±1）℃、深度 10 cm 的水中强迫游泳6 min（先适应2 min），记录后4 min内小鼠的累计不动时间。
1.2.3 利血平所致小鼠抑郁模型（眼睑下垂试验）[6-8]。
1.2.3.1试验分组。将雄性昆明种小鼠60只，随机分成5组，即正常组、生理盐水组、氯丙咪嗪阳性对照组、合欢皮水提液低剂量组（100 mg/kg）和合欢皮水煎剂高剂量组（300 mg/kg），每组12只，正常组不给任何药物。
1.2.3.2 利血平所致小鼠抑郁模型（眼睑下垂试验）。末次给药30 min后，每只小鼠按2.5 mg/kg腹腔注射利血平，观察小鼠眼睑下垂情况，并准确记录1 h内眼睑下垂度和肛门体温，观察自发活动、耳尾颜色等情况。按Rubin分级标准，判断下垂度：0度为正常开目；1度为眼睑下垂1/4；2度为眼睑下垂1/2；3度为眼睑下垂3/4；4度为眼睑完全闭合。
1.2.4 统计学分析。用统计软件进行数据分析，试验数据均用“x±s”表示，组间比较采用t检验，以P<0.05为差异显著。
2结果与分析
2.1小鼠悬尾试验 与生理盐水对照组比较，氯丙咪嗪和合欢皮水提液低、高剂量组小鼠悬尾6 min内的失望时间均显著缩短（P<0.05），见表1，合欢皮水提液组呈一定的剂量依赖性。
2.2小鼠强迫游泳试验 由表2可知，与生理盐水对照组比较，氯丙咪嗪组和合欢皮水提液低、高剂量组小鼠强迫游泳6 min内失望时间均显著缩短（P<0.05）；合欢皮水提液组呈一定的剂量依赖性。
2.3对利血平所致小鼠抑郁模型的影响由表3可知，小鼠给予利血平（2.5 mg/kg）后，出现较为明显的上睑下垂和体温下降等，小鼠闭眼、蜷缩，耳、尾皮肤颜色灰暗，与正常小鼠比较有明显差异，说明给正常小鼠腹腔注射利血平后，小鼠抑郁模型造模成功。与生理盐水对照组比较，合欢皮水提液低、高剂量组小鼠眼睑下垂度与体温下降幅度具有明显改善（P<0.05）。
3结论与讨论
试验结果表明，浓度100和300 mg/kg的合欢皮水提液均能明显缩短悬尾小鼠累计不动时间，并能明显缩短小鼠强迫游泳中的累计不动时间，且有一定的量效关系；而且，可明显对抗利血平所致抑郁小鼠模型的体温下降和眼睑下垂，说明合欢皮水提液有抗抑郁的作用。
利血平拮抗试验模型为较早建立的抑郁动物模型[9]，利血平属囊泡再摄取抑制剂，通过耗竭动物脑内单胺类递质，如去甲肾上腺素（NE）、5-羟色氨酸（5-HT）、多巴胺（DA）等递质的减少，诱发动物行为和生理发生改变。因此，合欢皮水提液抗抑郁作用的机制是否是通过影响小鼠脑内单胺类递质，而发挥抗抑郁作用的，仍需进一步研究。
参考文献
[1] 叶光明，姜云云，瞿发林，等.抗抑郁药的研究进展[J].中国药师，2006，9（10）：954-956.
[2] 宋立人.现代中药学大辞典[M].北京：人民卫生出版社，2001：876-879.
[3] 霍长虹，存书，作平，等.合欢皮水煎剂催眠作用的药理试验研究[J].河北医科大学学报，2002，23（4）：216-217.
[4] 李洁.欢皮与山合欢皮镇静催眠作用的比较研究[J].时珍国医国药，2005，16（6）：488.
[5] STERU L，CHERMAT R，THIERRY B，et al.The tail suspension test：a new method for screening antidepressants in mice[J].Psychopharmacology，1985，85（3）：367-670.
[6] 王榕乐，谭毓治，刘峰，等.冰片增强5-羟色氨酸抗抑郁作用的研究[J].广东药学院学报，2007，23（5）：550-555.
[7] 徐叔云，卞如濂，陈修.药理试验方法学[M].北京：人民卫生出版社，2002：808-810.
[8] PORSOLT R D，BERTIN A，JALFRE M.Behavioural despair in mice：A primary screening test for antidepressants[J].Arch Int Pharmacodyn Ther，1997，229（2）：327-336.
[9] 徐静华，蔡爽，于庆海，等.贯叶连翘提取物抗抑郁作用研究[J].中国药理与临床，2002，18（5）：29-30.
关键词 合欢皮（CORTEX ALBIZIAE）；抗抑郁作用；悬尾试验；强迫游泳试验
中图分类号S253文献标识码A文章编号0517-6611（2014）01-00057-02
基金项目四川师范大学校级青年项目（08QNL08）。
作者简介廖颖（1976-），女，四川成都人，副教授，硕士，从事生物医学研究，Email：ying_liao@qq.com。*通讯作者。
收稿日期20130906抑郁症是一种包括多种精神与躯体症状的情感性精神疾病。随着社会的发展，各种应激因素的增加，抑郁症的发病率也在快速的攀升，到2020年可能成为仅次于心脏病的第二大威胁人类健康的疾病[1]。因此，对抑郁症的发病机制及抗抑郁药的研究是当前的重要任务之一。从植物或传统中药中寻找高效低毒的抗抑郁药成为近年来精神类药物研究领域中的新方向。合欢皮（CORTEX ALBIZIAE）是豆科植物合欢（Albzia julibrissin Durazz）的干燥树皮，是一种较为常用的中药，性味甘、平，具有解郁、和血、宁心和消痈肿之功[2]。近年来，一些学者对合欢皮的镇静安神和活血化瘀等功效进行了较多的研究[3-4]，但对其抗抑郁作用的研究鲜有报道。研究采用不同的小鼠抑郁模型对合欢皮的抗抑郁作用进行初步分析，以期为研究合欢皮的进一步开发利用提供依据。
1 材料与方法
1.1 材料
1.1.1 研究对象。合欢皮购于成都同仁堂药店，经鉴定为地道药材（CORTEX ALBIZIAE）。
1.1.2 动物。KM小鼠，雄性，体重18～22 g，由四川省医学科学院试验动物研究所提供，生产许可证号：SCXK（川）2008-24。
1.1.3 主要试剂。利血平，购自广东邦民制药厂有限公司，产品批号：090512；氯丙咪嗪，购自天津药物研究院药业有限责任公司，产品批号：100120；95%乙醇，购自成都市科龙化工试剂厂。
1.2方法
1.2.1 小鼠悬尾试验[5-6]。
1.2.1.1 试验分组。取48只雄性KM小鼠，随机分成4组，每组12只，空白对照组灌胃给予生理盐水，氯丙咪嗪阳性对照组灌胃给予5 mg/kg氯丙咪嗪；合欢皮水提液低、高剂量组分别灌胃给予100和300 mg/kg的药物，末次给药后1 h进行试验。
1.2.1.2 小鼠悬尾试验及不动时间的测定。在上午8：00～12：00进行试验，末次给药1 h后，将小鼠尾部1 cm的部位贴在一水平木板上，头离地5 cm，使动物呈倒挂状态。用挡板隔开动物的视线，动物为克服不正常体位而挣扎活动，但活动一段时间后出现间歇不动状态，显示失望状态，以连续3 s以上的不动时间为有效不动时间；记录6 min内的不动时间。
1.2.2 小鼠强迫游泳试验[7-8]。
1.2.2.1 试验分组。同“1.2.1.1”方法操作。
1.2.2.2 小鼠强迫游泳试验及不动时间的测定。在上午8：00～12：00进行试验，末次给药后1 h，将小鼠分别置于水温（25±1）℃、深度 10 cm 的水中强迫游泳6 min（先适应2 min），记录后4 min内小鼠的累计不动时间。
1.2.3 利血平所致小鼠抑郁模型（眼睑下垂试验）[6-8]。
1.2.3.1试验分组。将雄性昆明种小鼠60只，随机分成5组，即正常组、生理盐水组、氯丙咪嗪阳性对照组、合欢皮水提液低剂量组（100 mg/kg）和合欢皮水煎剂高剂量组（300 mg/kg），每组12只，正常组不给任何药物。
1.2.3.2 利血平所致小鼠抑郁模型（眼睑下垂试验）。末次给药30 min后，每只小鼠按2.5 mg/kg腹腔注射利血平，观察小鼠眼睑下垂情况，并准确记录1 h内眼睑下垂度和肛门体温，观察自发活动、耳尾颜色等情况。按Rubin分级标准，判断下垂度：0度为正常开目；1度为眼睑下垂1/4；2度为眼睑下垂1/2；3度为眼睑下垂3/4；4度为眼睑完全闭合。
1.2.4 统计学分析。用统计软件进行数据分析，试验数据均用“x±s”表示，组间比较采用t检验，以P<0.05为差异显著。
2结果与分析
2.1小鼠悬尾试验 与生理盐水对照组比较，氯丙咪嗪和合欢皮水提液低、高剂量组小鼠悬尾6 min内的失望时间均显著缩短（P<0.05），见表1，合欢皮水提液组呈一定的剂量依赖性。
2.2小鼠强迫游泳试验 由表2可知，与生理盐水对照组比较，氯丙咪嗪组和合欢皮水提液低、高剂量组小鼠强迫游泳6 min内失望时间均显著缩短（P<0.05）；合欢皮水提液组呈一定的剂量依赖性。
2.3对利血平所致小鼠抑郁模型的影响由表3可知，小鼠给予利血平（2.5 mg/kg）后，出现较为明显的上睑下垂和体温下降等，小鼠闭眼、蜷缩，耳、尾皮肤颜色灰暗，与正常小鼠比较有明显差异，说明给正常小鼠腹腔注射利血平后，小鼠抑郁模型造模成功。与生理盐水对照组比较，合欢皮水提液低、高剂量组小鼠眼睑下垂度与体温下降幅度具有明显改善（P<0.05）。
3结论与讨论
试验结果表明，浓度100和300 mg/kg的合欢皮水提液均能明显缩短悬尾小鼠累计不动时间，并能明显缩短小鼠强迫游泳中的累计不动时间，且有一定的量效关系；而且，可明显对抗利血平所致抑郁小鼠模型的体温下降和眼睑下垂，说明合欢皮水提液有抗抑郁的作用。
利血平拮抗试验模型为较早建立的抑郁动物模型[9]，利血平属囊泡再摄取抑制剂，通过耗竭动物脑内单胺类递质，如去甲肾上腺素（NE）、5-羟色氨酸（5-HT）、多巴胺（DA）等递质的减少，诱发动物行为和生理发生改变。因此，合欢皮水提液抗抑郁作用的机制是否是通过影响小鼠脑内单胺类递质，而发挥抗抑郁作用的，仍需进一步研究。
参考文献
[1] 叶光明，姜云云，瞿发林，等.抗抑郁药的研究进展[J].中国药师，2006，9（10）：954-956.
[2] 宋立人.现代中药学大辞典[M].北京：人民卫生出版社，2001：876-879.
[3] 霍长虹，存书，作平，等.合欢皮水煎剂催眠作用的药理试验研究[J].河北医科大学学报，2002，23（4）：216-217.
[4] 李洁.欢皮与山合欢皮镇静催眠作用的比较研究[J].时珍国医国药，2005，16（6）：488.
[5] STERU L，CHERMAT R，THIERRY B，et al.The tail suspension test：a new method for screening antidepressants in mice[J].Psychopharmacology，1985，85（3）：367-670.
[6] 王榕乐，谭毓治，刘峰，等.冰片增强5-羟色氨酸抗抑郁作用的研究[J].广东药学院学报，2007，23（5）：550-555.
[7] 徐叔云，卞如濂，陈修.药理试验方法学[M].北京：人民卫生出版社，2002：808-810.
[8] PORSOLT R D，BERTIN A，JALFRE M.Behavioural despair in mice：A primary screening test for antidepressants[J].Arch Int Pharmacodyn Ther，1997，229（2）：327-336.
[9] 徐静华，蔡爽，于庆海，等.贯叶连翘提取物抗抑郁作用研究[J].中国药理与临床，2002，18（5）：29-30.