重型再生障碍性贫血细胞毒性T细胞免疫攻击靶点的体外实验

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目的

对重型再生障碍性贫血(SAA)患者细胞毒性T细胞所攻击的靶细胞以及各系、各阶段骨髓造血细胞的凋亡配体表达进行研究,为明确SAA免疫攻击的靶点提供依据。

方法

选取2011年3月至2012年3月天津医科大学总医院血液科收治的SAA患者15例,以15份正常骨髓标本作为对照,应用流式细胞术(FCM)检测骨髓CD34、CD14、CD33、GlycoA细胞凋亡相关因子(Fas)蛋白的表达量。免疫磁珠分选SAA患者骨髓中CD8 T细胞和对照骨髓中去除CD3细胞的骨髓单个核细胞(靶细胞),并进行共培养,FCM分析CD34、CD14、CD33、GlycoA细胞群凋亡率。

结果

SAA患者骨髓CD34细胞Fas蛋白的表达量(46.59%±27.60%)明显高于对照骨髓(8.89%±7.28%,P<0.01);SAA患者骨髓CD14、CD33、GlycoA细胞Fas蛋白的表达量(29.29%±9.23%、46.88%±14.30%、15.15%±9.26%)明显低于对照骨髓(51.25%±38.36%、72.06%±39.88%、50.38%±39.88%,均P<0.05)。体外实验中,实验组(SAA患者骨髓CD8T细胞与对照骨髓CD3细胞混合培养组)的CD34、CD33、CD14细胞凋亡率(55.43%±20.50%、38.13%±20.10%、61.87%±21.65%)均明显高于对照组(对照骨髓CD8T细胞与对照骨髓CD3细胞混合培养组)(35.02%±13.95%、23.44%±10.33%、37.04%±22.41%,均P<0.05)。

结论

SAA细胞毒性T细胞对正常的骨髓造血干/祖、粒系、单核系细胞均具有杀伤作用。Fas/Fas配体系统介导的细胞凋亡在SAA免疫发病中发挥了重要作用。同时CD34细胞Fas表达明显增加,可能是SAA免疫损伤的主要靶细胞。

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