【摘 要】
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目的:探讨生存素(Survivin)对3T3-L1脂肪细胞中载脂蛋白E(apolipoprotein E,ApoE)表达和分泌的影响.方法:构建Survivin过表达慢病毒载体及其对照载体,分别感染3T3-L1前脂肪细
【机 构】
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上海交通大学附属第六人民医院内分泌代谢科,上海,200233
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目的:探讨生存素(Survivin)对3T3-L1脂肪细胞中载脂蛋白E(apolipoprotein E,ApoE)表达和分泌的影响.方法:构建Survivin过表达慢病毒载体及其对照载体,分别感染3T3-L1前脂肪细胞并进行分化培养.在分化第8天对细胞进行转录组分析.采用实时定量PCR检测3T3-L1脂肪细胞中ApoE mRNA的表达,蛋白质印迹法检测胞内及分泌的APOE蛋白表达水平.结果:建立了稳定过表达Survivin的3T3-L1前脂肪细胞株,分化培养至第8天,过表达Survivin不影响脂肪细胞分化.转录组分析结果显示ApoE具有较高表达丰度,并且载脂蛋白家族中只有ApoE发生明显下调.Survivin过表达组细胞ApoE mRNA水平(t=9.676,P<0.01)以及蛋白水平(t=4.183,P<0.05)均显著低于对照组,并且细胞培养上清液中APOE分泌蛋白的表达水平同样显著低于对照组(t=5.683,P<0.01).结论:Survivin在3T3-L1脂肪细胞中过表达时,能够在转录以及蛋白水平特异性下调3T3-L1脂肪细胞ApoE的表达.
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