【摘 要】
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将新城疫病毒(四平株)F基因插入到pFastBac I质粒中,构建了重组质粒pFF.pFF转化大肠杆菌DH10Bac后,F基因在助手质粒(helper plasmid)提供转座酶的情况下,通过转座进入Bacmid,
【机 构】
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解放军军需大学动物科技系,解放军军需大学军事兽医研究所
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将新城疫病毒(四平株)F基因插入到pFastBac I质粒中,构建了重组质粒pFF.pFF转化大肠杆菌DH10Bac后,F基因在助手质粒(helper plasmid)提供转座酶的情况下,通过转座进入Bacmid,构建了重组Bacmid(re-Bacmid).在含有X-gal/IPTG、庆大霉素、卡那霉素和四环素的琼脂平板上,筛选白色菌落后,提取re-Bacmid转染Sf-9昆虫细胞.在昆虫细胞内,re-Bacmid经复制、表达、装配,形成重组杆状病毒,并表达F蛋白.经SDS-PAGE和Western-b
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