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目的：探讨手足口病病原体EV71病毒的分离方法。方法：取手足口病患儿的粪便,经磷酸盐缓冲液（PBS）稀释后用0.22μm滤膜过滤,将悬液接种于Vero细胞。通过EV71病毒致细胞病变效应（CPE）分析、电镜分析、EV71病毒特异性核酸及蛋白的聚合酶链反应（PCR）及Western Blotting分析来鉴定病毒分离和致病效果。检测病毒悬液对于宿主细胞Vero增殖抑制的效果。结果：标本悬液接种Vero细胞48h后出现CPE。收集感染细胞的培养基上清液,连续感染2次,均出现同样的CPE。电镜检测发现在感染组V