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目的：介绍一种可以稳定地获得高活性心肌细胞的急性分离方法，以便更有利于心肌细胞电生理研究和分子生物学研究。方法：用正常SD大鼠，麻醉成功后迅速取出心脏，以主动脉逆挂于Langendorff灌流装置上，先以无钙台氏液灌流5min然后换以酶液灌流20min，分次采集心肌组织获取心肌细胞并保存于KB液中。结果：获得大量高活性（78％±7．5％）的心肌细胞，杆状，轮廓和横纹清晰，折光性好。结论：本文介绍的方法稳定性好，获得的心肌细胞数量多，活性好，适合用于心肌细胞电生理和分子生物学研究。