【摘 要】
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目的探讨降钙素基因相关肽(CGRP)对肺炎克雷伯杆菌脂多糖(LPS)诱导炎症反应的影响。方法体外培养肺炎克雷伯杆菌提取其LPS,不同浓度LPS刺激BEAS-2B细胞后,通过免疫荧光法检测细胞内人类β防御素2(hBD-2)的活化情况,并检测不同浓度CGRP处理后细胞内hBD-2的活性;MTT试验以及流式细胞术分别检测LPS刺激以及CGRP共同处理后BEAS-2B细胞的增殖以及凋亡水平;最后以中性粒细
【机 构】
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目的探讨降钙素基因相关肽(CGRP)对肺炎克雷伯杆菌脂多糖(LPS)诱导炎症反应的影响。
方法体外培养肺炎克雷伯杆菌提取其LPS,不同浓度LPS刺激BEAS-2B细胞后,通过免疫荧光法检测细胞内人类β防御素2(hBD-2)的活化情况,并检测不同浓度CGRP处理后细胞内hBD-2的活性;MTT试验以及流式细胞术分别检测LPS刺激以及CGRP共同处理后BEAS-2B细胞的增殖以及凋亡水平;最后以中性粒细胞明胶酶相关载脂蛋白(NGAL)作为其特异性颗粒的标记物,检测CGRP处理后细胞内中性粒细胞颗粒的释放水平。
结果免疫荧光检测结果显示,不同浓度LPS刺激均能够显著增加细胞内hBD-2的相对表达量,而用CGRP处理后则会显著抑制hBD-2的表达;50 ng/ml、100 ng/ml和200 ng/ml的LPS对BEAS-2B细胞的细胞活性无显著影响,而用400 ng/ml LPS处理24 h,则能够显著降低细胞活性,促进细胞凋亡。当用10 nmol/L CGRP与LPS共同处理时,能明显增加细胞活性,抑制细胞凋亡;不同浓度的LPS均能刺激中性粒细胞特异性颗粒的释放。而10 nmol/L CGRP则能够显著抑制LPS引起的中性粒细胞特异性颗粒释放。
结论CGRP能够抑制hBD-2表达、促进细胞增殖并减少中性粒细胞的脱颗粒,进而下调肺炎克雷伯杆菌LPS诱导的炎症反应。
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