目的 观察过氧化物酶体增殖物活化受体γ配体吡格列酮对高糖作用下大鼠腹膜间皮细胞(RPMC)合成细胞外基质的作用以及调节机制.方法 胰蛋白酶消化法分离培养RPMC.随机分为正常对照组、高糖组(2.5%葡萄糖)、吡格列酮干预组(10 μmol/L、20μmol/L+2.5%葡萄糖)、二硫氨基甲酸吡咯烷干预组(PDTC,NF-KB抑制剂,25 μmol/L、50μmol/L+2.5%葡萄糖)、姜黄素干预组[活化蛋白1(AP-1)抑制剂,15 μmol/L、30 μmol/L+2.5%葡萄糖].RT-PCR方法检测纤连蛋白(FN)、Ⅰ型胶原(COL Ⅰ)、纤溶酶原激活抑制因子1(PAI-1)、c-fos、c-jun mRNA表达.ELISA方法检测细胞上清液中FN、COL Ⅰ和PAI-1蛋白水平.Western印迹方法检测IKBα、磷酸化IKBα(p-IKBα)、NF-KBp65、磷酸化NF-KBp65(p-p65)蛋白表达.结果 常规培养的腹膜间皮细胞表达基础量的FN、COL Ⅰ和PAI-1,高糖显著上调其蛋白及mRNA表达(P＜0.01).吡格列酮预处理后,高糖诱导的FN、COL Ⅰ和PAI-1蛋白及mRNA表达显著低于高糖组(P＜0.01).高糖作用后,磷酸化IKBαNF-kBp65水平显著增高,c-fos、c-jun mRNA表达增加,与对照组差异有统计学意义(P＜0.01).PDTC预处理后,高糖诱导RPMC的FN和PAI-1蛋白水平降低(P＜0.01),COL Ⅰ蛋白表达无明显变化.AP-1抑制剂姜黄素预处理后,高糖诱导的RPMC FN、COL Ⅰ和PAI-1蛋白水平均显著降低,与对照组差异有统计学意义(P＜0.01).吡格列酮抑制高糖条件下磷酸化IKBα和NF-KB p65水平,抑制c-fos、c-jun mRNA表达(P＜0.05或P＜0.01).结论 NF-KB和AP-1信号通路参与高糖条件下RPMC的FN、COL Ⅰ和PAI-1表达的调节.吡格列酮通过NF-KB和AP-1途径下调高糖诱导的RPMC的FN、COL Ⅰ和PAI-1的表达,从而发挥抗纤维化作用。
吡格列酮对高糖诱导大鼠腹膜间皮细胞合成细胞外基质的作用及机制
【摘 要】
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目的 观察过氧化物酶体增殖物活化受体γ配体吡格列酮对高糖作用下大鼠腹膜间皮细胞(RPMC)合成细胞外基质的作用以及调节机制.方法 胰蛋白酶消化法分离培养RPMC.随机分为正常对照组、高糖组(2.5%葡萄糖)、吡格列酮干预组(10 μmol/L、20μmol/L+2.5%葡萄糖)、二硫氨基甲酸吡咯烷干预组(PDTC,NF-KB抑制剂,25 μmol/L、50μmol/L+2.5%葡萄糖)、姜黄素干预
【机 构】
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现在中国医科大学附属盛京医院肾内科,110001,沈阳,中国医科大学附属第一医院肾内科,中国医科大学附属盛京医院肾内科,110001,沈阳,中国医科大学附属第一医院肾内科
【出 处】
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中华肾脏病杂志
【发表日期】
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2010年26期
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