【摘 要】
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目的 探讨经MACS系统体外分选小鼠诱导性多能干细胞(induced pluripotent stem cells,iPS) IP14D-1得到纯度较高诱导性原始生殖细胞(induced primordial germ cells,iPGCs)的
【基金项目】
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国家自然科学基金;深圳市科技计划重点项目;深圳市科技研发资金基础研究计划资助项目
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目的 探讨经MACS系统体外分选小鼠诱导性多能干细胞(induced pluripotent stem cells,iPS) IP14D-1得到纯度较高诱导性原始生殖细胞(induced primordial germ cells,iPGCs)的方法,并对其表面标志、形态进行鉴定.方法 未分化IP14D-1细胞培养扩增,分化形成iEBs (induced embryoid bodies,iEBs),以4、7、9d的iEB为研究对象,胰酶消化制成单细胞悬液,用特异性表面抗原Ssea-1 (special stage embryonicantigen1)单抗标记,间接免疫磁珠法分选得到Ssea-1阳性细胞,即为假定iPGCs.采用免疫荧光和碱性磷酸酶染色鉴定假定iPGCs,流式细胞术鉴定MACS分选得到的目的细胞群纯度.结果 分选得到的Ssea-1阳性细胞表达PGC特异性表面标志Blimp1和组织非特异碱性磷酸酶(TNAP);7d的iEB分选获得细胞经扩增后iPGC量较多(83.5％).结论 MACS分选方法可作为获得较纯化的iPGC体外分选体系.
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