【摘 要】
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启动子是重要的转录调控元件,广泛用于工业菌株的代谢工程改造。谷氨酸棒杆菌Corynebacterium glutamicum是重要的氨基酸生产菌株,但已报道的组成型强启动子较少。对谷氨酸高
【机 构】
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天津科技大学生物工程学院; 中国科学院系统微生物工程重点实验室; 中国科学院天津工业生物技术研究所;
【基金项目】
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天津市科技计划项目(Nos.15PTCYSY00020,14ZCZDSY00058);天津市特支计划高层次创新创业团队;国家自然科学基金(No.31700044)资助~~
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启动子是重要的转录调控元件,广泛用于工业菌株的代谢工程改造。谷氨酸棒杆菌Corynebacterium glutamicum是重要的氨基酸生产菌株,但已报道的组成型强启动子较少。对谷氨酸高产菌Corynebacterium glutamicum SL4发酵过程的10个时间点样品进行转录组测序,筛选在发酵过程中稳定转录并且转录水平最高的10个基因;分别克隆其启动子序列至红色荧光蛋白（RFP）报告系统,通过荧光强度表征启动子在SL4菌株中的强度,再在野生型C. glutamicum ATCC 13869和ATCC 13032中验证部分启动子的通用性;并采用LacZ蛋白进一步评价强启动子的表达效果。结果显示,成功筛选到3个可以通用的组成型启动子PcysK、PgapA和PfumC。其中PcysK的表达强度最高,与诱导型强启动子Ptac对比,在SL4和13869菌株中均达到其2倍（RFP）和4倍（LacZ）以上;在ATCC 13032菌株中,PcysK的表达强度为Ptac的0.3-0.4倍。Pcys K首次被报道为强启动子,可用于谷氨酸棒杆菌强化合成途径的代谢工程改造。
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