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利用单因子试验,测试了女贞ISSR—PCR反应体系中的主要影响因子。经过优化实验,建立了一套适合于女贞的稳定的ISSR-PCR反应体系:10×buffer 2.5μL,2.0mmol·L^-1的MgCl2,200μmol·L^-1的dNTPs,1.5U的Taq酶,0.4的μmol·L^-1的引物,10ng的DNA模板。PCR扩增程序为:94℃预变性4min,94℃变性40s,52~62℃退火45s,72℃延伸120s,进行35个循环,72℃延伸8min,4℃保存。应