【摘 要】
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目的:应用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)、核苷酸序列分析等技术,尝试建立一种可直接从鼠肺标本中进行汉坦病毒基因分析的方法.方法:提取经免疫荧光法检测汉坦病毒抗原阳性的
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目的:应用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)、核苷酸序列分析等技术,尝试建立一种可直接从鼠肺标本中进行汉坦病毒基因分析的方法.方法:提取经免疫荧光法检测汉坦病毒抗原阳性的鼠肺细胞总RNA,经逆转录获取病毒cDNA,纯化,克隆于pMD-18T载体,测定S基因片段核苷酸序列.结果:采用RT-PCRT/A克隆技术成功地从鼠肺组织中扩增出汉坦病毒S基因全序列,序列长为1 701 nt.只有一个编码N蛋白的开放读码框架(ORF),起始密码子为第37 nt,终止于1 326 nt,推导其编码的蛋白长为429个氨基酸
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