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根据禽源隐孢子虫GP20基因,设计1对保守引物和1对特异性引物,建立巢氏PCR检测方法,并进行验证.该巢氏PCR能特异性地扩增出496bp的禽源隐孢子虫基因组DNA中相应片段,最低能检测到0.52fg的阳性参照DNA.建立的巢氏PCR方法具有高度的特异性和敏感性,可以用于样品的检测.通过该方法鉴定山东省德州地区养鸡场中感染鸡的隐孢子虫种类为C.baileyi,感染率为31.5%.