恙虫病东方体的分离及外膜蛋白基因序列分析

来源 :中国公共卫生 | 被引量 : 0次 | 上传用户:llt009
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目的 对福建省平潭岛的恙虫病病人、宿主动物和媒介恙螨进行现场调查和恙虫病东方体分离 ,并对其5 6kD外膜蛋白基因序列进行测定和分析 ,为有针对性的防制提供依据。方法 将病人血、鼠脏器、地里纤恙螨标本分别腹腔接种小白鼠分离东方体 ,小鼠腹壁刮液经Gimesa染色镜检 ;PCR扩增分离株的东方体 5 6kD外膜蛋白基因片段 ,并进行测序及多序列比较和进化树分析。结果 其中 1份病人血标本、1份鼠脏器标本及 1份恙螨标本腹腔接种的小白鼠 ,12d后出现耸毛、弓背、厌食、腹部增大等典型东方体感染症状 ,解剖后见肝脾肿大或腹水 ,显微镜下清淅可见细胞浆内短杆状或球杆状东方体 ,共分离出Pt1、Pt2、及Pt33株东方体。 3株东方体用设计的引物分别扩增出约 135 0bp特异性 5 6kD基因片段。序列测定结果表明 ,此 3株东方体之间 5 6kD基因片段同源性大于 99%。它们与Ot标准株Karp、Kato、Gilliam及地方株Kawassaki、Kuroki的同源性分别为 93 8% ,6 6 2 % ,85 1% ,6 9 6 % ,84 2 %。 结论 从恙虫病病人、宿主及媒介均分离到恙虫病东方体 ,证实了平潭岛恙虫病春季恙虫病的存在 ,并从分子水平上证实该分离株与Karp株同源性较高
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