探讨微小RNA(miRNA，miR)-93-5p调控胰腺癌细胞对吉西他滨敏感性及其机制。
方法将抗miR-NC(anti-miR-NC组)、抗miR-93-5p(anti-miR-93-5p组)、miR-NC(miR-NC组)、miR-93-5p(miR-93-5p组)、pcDNA-NC(pcDNA-NC组)和pcDNA-F-box富含亮氨酸重复蛋白5(FBXL5)(pcDNA-FBXL5组)转染至Capan-1胰腺癌细胞(购自中国科学院细胞库)，将anti-miR-93-5p分别与si-NC、si-FBXL5共转染至胰腺癌细胞，标记为anti-miR-93-5p＋si-NC组和anti-miR-93-5p＋si-FBXL5组。实时定量反转录聚合酶链反应(RT-qPCR)法检测mRNA表达；蛋白质印迹法(Western blot)检测蛋白表达；噻唑蓝法(MTT)检测细胞存活率；流式细胞仪检测细胞凋亡；荧光素酶报告实验检测miR-93-5p和FBXL5的靶向关系。采用t检验或单因素方差分析比较不同组间计量资料差异。
结果吉西他滨组Capan-1胰腺癌细胞miR-93-5p表达低于对照组(0.32±0.29比1.00±0.10，t＝6.650，P<0.05)，FBXL5基因mRNA和蛋白表达高于对照组(mRNA为3.14±0.31比1.00±0.02，蛋白为1.12±0.12比0.40±0.03，t＝19.710、17.076，P<0.05)。anti-miR-93-5p组胰腺癌细胞miR-93-5p、细胞周期蛋白D1(Cyclin D1)、多药耐药基因相关蛋白1(MRP1)、细胞存活率和半数抑制浓度(IC50)低于anti-miR-NC组[0.35±0.04比1.00±0.11、0.45±0.05比1.15±0.12、0.33±0.03比0.75±0.08、(52.44±5.24)%比(97.22±10.03)%、(7.29±0.73) mg/L比(22.13±2.11) mg/L，t＝16.660、16.154、14.747、12.667、19.940，P值均<0.05]，裂解的半胱氨酰天冬氨酸特异性蛋白酶-3(cleaved-Caspase-3)和细胞凋亡率高于anti-miR-NC组(0.85±0.09比0.39±0.04、16.27±1.63比4.25±0.43，t＝14.012、21.391，P<0.05)。miR-93-5p靶向调控FBXL5基因表达。anti-miR-93-5p组胰腺癌细胞磷磷酸化磷脂酰肌醇3激酶(p-PI3K)和磷酸化蛋白激酶B(p-Akt)蛋白表达低于anti-miR-NC组(0.25±0.03比0.75±0.08、0.38±0.04比0.89±0.09，t＝20.176、12.399，P<0.05)。anti-miR-93-5p＋si-FBXL5组胰腺癌细胞p-PI3K和p-Akt蛋白表达高于anti-miR-93-5p＋si-NC组(0.66±0.07比0.32±0.04、0.79±0.08比0.42±0.05，t＝16.433、19.128，P<0.05)。
结论抑制miR-93-5p表达可增强胰腺癌细胞对吉西他滨的敏感性，其机制可能与miR-93-5p靶向调控FBXL5及PI3K/Akt信号通路有关。