【摘 要】
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探究新风胶囊(XFC)通过调控lncRNA MAPKAPK5-AS1(MK5-AS1)对类风湿关节炎(RA)滑膜成纤维细胞(FLS)凋亡和炎症的影响.收集健康人(正常组)和RA脾虚湿盛证患者(RA组)各30例,RA患者入院后予XFC口服治疗(XFC组),提取外周血单个核细胞(PBMCs),观察MK5-AS1与临床指标的相关性,及XFC治疗前、后MK5-AS1的表达;建立RA-FLS细胞系,制备XFC含药血清,构建MK5-AS1过表达质粒,转染至RA-FLS中,观察XFC含药血清通过MK5-AS1对RA-F
【机 构】
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安徽中医药大学第一附属医院风湿科,安徽合肥230031
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探究新风胶囊(XFC)通过调控lncRNA MAPKAPK5-AS1(MK5-AS1)对类风湿关节炎(RA)滑膜成纤维细胞(FLS)凋亡和炎症的影响.收集健康人(正常组)和RA脾虚湿盛证患者(RA组)各30例,RA患者入院后予XFC口服治疗(XFC组),提取外周血单个核细胞(PBMCs),观察MK5-AS1与临床指标的相关性,及XFC治疗前、后MK5-AS1的表达;建立RA-FLS细胞系,制备XFC含药血清,构建MK5-AS1过表达质粒,转染至RA-FLS中,观察XFC含药血清通过MK5-AS1对RA-FLS炎症和凋亡的影响.MK5-AS1在RA脾虚湿盛证患者PBMCs中表达降低(P＜0.001),ROC曲线结果显示AUC为83.9％,相关性分析结果表明MK5-AS1与ESR、CRP、RF、CCP和脾虚湿盛证证候积分呈负相关,XFC治疗后MK5-AS1表达升高(P＜0.001).关联规则结果显示,XFC治疗与MK5-AS1、ESR、CRP、RF及脾虚湿盛证证候积分下降的支持度均大于83％、置信度均大于80％和提升度均大于1.RT-qPCR结果显示,经TNF-α刺激后RA-FLS中MK5-AS1 RNA表达降低(P＜0.01);XFC含药血清干预后MK5-AS1 RNA表达升高(P＜0.05);经转染pcDNA3.1-MK5-AS1后MK5-AS1 RNA表达升高(P＜0.01).ELISA结果显示,经TNF-α刺激后RA-FLS中促炎因子IL-17表达升高、抑炎因子IL-4表达降低(P＜0.01);XFC含药血清干预后IL-17表达降低、IL-4表达升高(P＜0.01);经转染pcDNA3.1-MK5-AS1后IL-17表达降低、IL-4表达升高(P＜0.01).免疫荧光(IF)结果显示,经TNF-α刺激后RA-FLS中促凋亡蛋白Bax表达降低、抑凋亡蛋白Bcl-2表达升高(P＜0.01);XFC含药血清干预后Bax表达升高、Bcl-2表达降低(P＜0.01);经转染pcDNA3.1-MK5-AS1后Bax表达升高、Bcl-2表达降低(P＜0.05).MK5-AS1在RA-PBMCs和RA-FLS中表达均降低,XFC可通过调控MK5-AS1,抑制RA炎症反应和促进细胞凋亡,治疗RA.
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