应用AdEasy腺病毒载体系统构建血管内皮生长因子165重组腺病毒

来源 :组织工程与重建外科杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户：wufato

【摘要】

：

目的利用AdEasy腺病毒载体系统构建血管内皮生长因子165（VEGF165）重组腺病毒，并在293T细胞中扩增。方法将PCR获取的VEGF165基因酶切并插入到pAdTrack-CMV中，构建成腺病毒穿梭质粒

【作者】

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高全文宋慧锋柴家科柳春明

【机构】

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中国人民解放军总医院第一附属医院烧伤整形科,中国人民解放军总医院

【出处】

：

组织工程与重建外科杂志

【发表日期】

：

2008年5期

【关键词】

：

腺病毒血管内皮生长因子165 基因工程 Adenovirus Vascular endothelial growth factor 165 Gene engi

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目的利用AdEasy腺病毒载体系统构建血管内皮生长因子165（VEGF165）重组腺病毒，并在293T细胞中扩增。方法将PCR获取的VEGF165基因酶切并插入到pAdTrack-CMV中，构建成腺病毒穿梭质粒pAdTrack-VEGF165，经PmeI酶切线性化后，采用电穿孔转化到事先电转化腺病毒骨架质粒pAdEasy-1的BJ5183大肠杆菌感受态细胞中，挑选同源重组菌落。提取质粒并用Pac I酶切鉴定，线性化重组质粒pAdEasy-VEGF165转染293T细胞，包装成重组腺病毒颗粒，荧光显微镜下观

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