【摘 要】
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目的：克隆表达并纯化肠出血性大肠杆菌（EHEC）O157：H7紧密粘附素胞外特异性片段（intiminC）,摸索其免疫检测的初步应用。方法：设计引物采用PCR法自EHEC O157：H7基因组扩增紧密粘附素胞
【机 构】
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四川省广安市疾病预防控制中心,北京解放军306医院检验科,第三军医大学检验系临床微生物及免疫学教研室
【基金项目】
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国家自然科学基金资助课题（30770514）.
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目的：克隆表达并纯化肠出血性大肠杆菌（EHEC）O157：H7紧密粘附素胞外特异性片段（intiminC）,摸索其免疫检测的初步应用。方法：设计引物采用PCR法自EHEC O157：H7基因组扩增紧密粘附素胞外特异性片段的编码基因eaeC,T-A克隆后构建原核表达质粒pET-21a（＋）-eaeC,经测序鉴定后转化E.coliBL21（DE3）,IPTG诱导表达,PAGE检测。目的蛋白经包涵体洗涤,使用含谷胱甘肽氧化还原系统的复性缓冲液进行稀释并结合透析复性后,再用阴离子交换柱Resource Q和分子筛
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