非洲猪瘟病毒p35蛋白作为诊断抗原的抗原性比较

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为了筛选出酶联免疫吸附测定(Enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)反应性最佳的非洲猪瘟病毒(African swine fever virus,ASFV)诊断抗原,通过建立ELISA方法,以杆状病毒昆虫细胞表达系统表达的ASFV p30蛋白诊断抗原为参照,首次探讨原核表达系统表达的ASFV p35蛋白作为诊断抗原的抗原性和潜力.免疫印迹和免疫荧光结果表明,获得了40kDa的重组p35蛋白和30kDa的p30蛋白,两种蛋白与ASFV阳性血清均具有较好的免疫反应原性.采用重组p30和p35蛋白作为诊断抗原分别建立ELISA方法,并验证其敏感性、稳定性以及与进口试剂盒的符合率.结果显示,尽管p35-ELISA方法的检测敏感性稍低于p30-ELISA方法,但其敏感性仍可达95.8%,且p35-ELISA方法和p30-ELISA方法的批内和批间变异系数均小于10%.p35-ELISA方法与进口试剂盒比较,符合率达97.2%.结果表明建立的p35-ELISA方法敏感性高且稳定性好,可应用于ASFV感染血清的检测.
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