【摘 要】
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目的 建立稳定的体外大鼠肾小管上皮细胞(NRK cells)缺血再灌注模型,寻找建立模型的最佳条件.观察大鼠Ppif基因在该模型中的表达.方法 体外培养NRK细胞,以氧糖剥夺(krebs)液及使用去氧剂连二亚硫酸钠(Na_2 S_2O_4 mmol/L)和厌氧产气袋充以N_2和CO_2(95%N_2/5%CO_2),以模拟体外NRK细胞缺血再灌注,Annexin V/PI染色后,流式细胞仪检测细胞
【机 构】
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目的 建立稳定的体外大鼠肾小管上皮细胞(NRK cells)缺血再灌注模型,寻找建立模型的最佳条件.观察大鼠Ppif基因在该模型中的表达.方法 体外培养NRK细胞,以氧糖剥夺(krebs)液及使用去氧剂连二亚硫酸钠(Na_2 S_2O_4 mmol/L)和厌氧产气袋充以N_2和CO_2(95%N_2/5%CO_2),以模拟体外NRK细胞缺血再灌注,Annexin V/PI染色后,流式细胞仪检测细胞凋亡率,用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测Ppif基因(CypD的编码基因)的mRNA表达.结果 去氧去糖40 min再复氧复糖后,NRK细胞凋亡率于16h达到最高值(P<0.05).Ppif mRNA再灌注16 h时达高峰,48 h开始回落,各时段与0 h比较,差异均有统计学意义(P<0.05).结论 本模型可以模拟体内缺血再灌注机制,去氧去糖40 min后再复氧复糖16 h是体外NRK细胞缺血再灌注诱导凋亡的最佳条件。
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目的 观察肿瘤干细胞标记物CD24、CD44、ESA和CD34在胆道肿瘤中的表达,初步明确其能否用于胆道肿瘤干细胞的分选.方法 运用组织化学和流式细胞术检测CD24、CD44、ESA和CD34在人胆道肿瘤细胞株和组织中的表达率.结果 CD24、CD44和ESA在人胆管癌和胆囊癌细胞株及组织中均有表达,胆管癌细胞株QBC939和胆囊癌细胞株GBC-SD中CD24~+CD44~+ ESA~+平均表达率
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