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摘要：邵阳市系国家级西甜瓜区域性良种繁育基地，位于湘中偏西南，气侯湿润，雨水充沛，不利于黄瓜绿斑驳花叶病毒病的传播与侵害。多年的实践证明，通过科学的栽培管理、采后种子消毒、干热杀菌等一系列技术措施，可生产出不携带黄瓜绿斑驳花叶病毒病病原物、不携带细菌性果腐病病菌的杂交亲抗水瓜砧木健康种子，这些种子应用于生产反映良好。
关键词：亲抗水瓜；杂交；砧木；健康种子；技术规程
1适用范围
为生产出不携带黄瓜绿斑驳花叶病毒病病原物、不携带细菌性果腐病病菌的杂交亲抗水瓜砧木健康种子，特制定本生产技术规程。本规程适用邵阳地区杂交亲抗水瓜砧木生产基地。
2规范性引用文件
GB16715.1瓜类作物种子·瓜类；GB/T3543.1-GB/T3543.7农作物种子检验规程；GB/T7414-GB/T7415主要农作物种子包装及贮藏。
3术语和定义
3.1亲抗水瓜
属葫芦科葫芦属瓠瓜种作物，该品种系湖南雪峰种业有限责任公司于20世纪80年代从日本引进的西瓜砧木专用品种，亲本经多年的提纯复壮，抗性和亲和力表现特别好。
3.2杂交制种
用父本雄花花粉给母本雌花授粉结实，得出具有杂交优势的亲抗水瓜杂交种子的过程。
3.3制种用亲本
制种所用亲本是用原种繁育一代、二代，质量达到GB 16715.1的亲本种子。制种用亲本只能用于杂交制种，不能用于繁殖。
3.4健康种子
是通过栽培管理、种子采收后药剂消毒、干热杀菌等一系列技术措施生产出来且不携带黄瓜绿斑驳花叶病毒病和细菌性果腐病病原的种子。
4生产管理
4.1制种田的选择
选择5～7a（年）未种过葫芦科、茄科、烟草等作物地块作为制种田。前茬适宜的作物是水稻等。制种田以肥沃、排灌方便、有机质含量高、pH值呈中性的土壤为宜。制种田周边要求1000m内不能种植其他水瓜品种或其他瓜类作物，确保水瓜制种纯度达标和无黄瓜绿斑驳花叶病毒病、细菌性果腐病的交叉感染。
4.2亲本种子的准备
杂交制种亲本种子必须符合GB16715.1质量标准，同时具备原品种（系）特征特性、纯度不低于99.7%、发芽率不低于90%的国家标准一级的亲本种子。父本和母本种子配备比例为1：10。
4.3整畦与育苗
按2m宽开畦，单行种植，畦沟宽0.25m，沟深0.20m。每667m2瓜沟施入m氮：m五氧化二磷：m氧化钾=15：15：15的三元复合肥40kg、钙镁磷肥50kg，肥料与土壤充分拌匀，瓜行整成龟背形，开好围沟、厢沟、腰沟，畦沟做到沟沟相通，制种田块雨后无渍水。在雨后瓜行土壤湿润时铺封好宽0.8m银灰色微膜，以利于避蚜虫，保水保肥，防止杂草滋生。南方地区在3月下旬至4月上旬育苗。父本播种要较母本播种提早7～10d，这样既保证父、母本花期相遇，也利于根据父本品种特征特性，拔除杂株，提高制种纯度。
4.4定植及植株调整
在苗龄15～20d，即1叶1心时定植为宜。定植株距依土壤肥力而定。父本定植地块与母本定植地块明显分开，株距1m，每穴1株，667m2定植333株。母本株距0.8m，每穴1株，667m2定植420株。移栽时在穴内放“一特片”1片，防苗期蚜虫。父本5叶期摘心、以后不整枝；母本3～4叶采用150mg·L-1乙烯利喷施叶面和生长点，可增加雌花量，5叶期摘心，在叶腋处留2条方向一致、粗壮的子蔓。在子蔓6～8片叶腋内留孙蔓作授粉坐果蔓。子蔓10片叶时摘心促生长。当母本雌花子房经过授粉后，果实长至碗口大时，瓜后留5片叶摘心。整枝应在晴天进行，以免伤口感染，诱发病害。操作时用医用酒精和10%磷酸三钠将手及用具进行擦洗，可杀灭病菌，防止传播病毒和细菌。
5杂交用具
目前亲抗水瓜杂交制种主要采用手工杂交，杂交的主要用具是24号细铁丝，将铁丝制成周长4cm左右的“U”环，用于卡花并做杂交标记。
6杂交的步骤与方法
6.1父本纯度鉴定
在授粉前1周，认真检查父本纯度，将株型不一、叶型不一、子房形态不一的杂株全部拔除，确保父本植株纯正，方可进行杂交授粉。
6.2卡花与采集花粉
卡花是为了防止自交和非目的性杂交。方法是将次日即将开放的母本雌花大花蕾（选择强壮的花蕾，并将第1雌花及将要开放的瘦小花蕾摘除），用细铁丝将花冠卡住，不讓其任意放开，以免在次日未授粉前由昆虫进行非目的性杂交或自交。每卡1朵花，在花蕾旁边的叶子上再插1枚细铁丝或颜色亮丽的毛线，以供在次日授粉结束后作杂交标记用。父本花粉的采集可以在开花前1d傍晚将次日杂交用的父本花蕾用细铁丝卡住，在杂交当天开花前带柄取下，插入清水中用于授粉；也可在开花前1d傍晚根据需要量将父本雄花的花蕾摘下，盛于容器中进行适当的干燥，次日授粉将花药集中于贮粉瓶中，用毛笔搅拌均匀成为混合花粉，供授粉用。
6.3授粉
一般以孙蔓3～4节位长出的雌花授粉为宜。授粉时取下雌花花冠上的细铁丝，剥开雄花花冠，用雄花花药上的花粉轻轻地、均匀涂抹在雌花的柱头四周，在柱头四周涂抹的花粉越多，制种产量就越高。一般1朵雄花授2～3朵雌花，也可用毛笔蘸上混合花粉涂于雌花柱头上。授粉结束后仍将原来的细铁丝卡住花冠，以防传粉昆虫进入花内授粉，降低杂交种种子纯度。同时，将花蕾旁边叶子上的备用细铁丝或毛线系于花柄上（不可系得太紧），以做杂交标记。授粉必须采用当天开放的雄花花粉。授粉工作一般在17：00-19：00进行。
7授粉后的管理 7.1选留果
亲抗水瓜的子房在杂交授粉后的3～4d迅速膨大，幼瓜长至拳头大时，表明该株果实已坐住，一般每株母本坐住2～3个授粉果，可停止授粉。授粉幼瓜坐果部位应尽可能一致。同时，随时检查，及时去掉烂果、病果、发育不良的果实。
7.2摘心、整枝、疏果
幼瓜长至碗口大小时，瓜后留5～6叶摘心。并将其他无效枝打掉；去除植株基部的老叶、病叶，以增强通风透光；摘除未授粉的花蕾和未杂交的果实，每隔几天进行1次。这一措施既可以防止未杂交花朵的结果，也有利于使植株的养分充分供应到杂交果实上，促进种瓜成熟，提高种子的饱满度。
7.3清理父本
杂交亲抗水瓜制种田母本授粉工作结束后，要立即将整个田区的父本全部铲除干净，严禁父本植株坐果留种，确保育种者的合法权益。
7.4对杂交授粉果实作第2次标记
在采收前10d，认真检查杂交授粉果实，对果实上有授粉标记的，再用油漆或记号笔在杂交果实上作二次标记，再次确认是人工杂交授粉的果实。对未有记号標记的“自交果”，或标记不清楚的果实严格摘除，并连同瓜秧一起拔除，确保田区内没有“自交果”。
8病虫害防治
亲抗水瓜砧木制种期间主要病虫害有黄守瓜、蚜虫、蓟马、白粉病、炭疽病等。农业防治可采取水旱轮作，高畦定植，石灰水消毒等农艺措施；药剂防治虫害：黄守瓜幼虫用90%敌百虫乳油1500倍液，成虫用20%氰戊菊酯乳油2000倍液喷雾；防蚜虫和蓟马用10%吡虫啉可湿性粉剂2000倍液喷雾防治；白粉病用15%粉锈宁可湿性粉剂1500倍液或50%硫磺悬浮液500倍液喷雾。炭疽病发病初期用40%炭疽福美400倍液喷雾，发病中后期可用50%甲霜灵500倍液喷雾。
9种子采收
授粉后55～60d，果实已经成熟，果实内的种子达到生理和形态完全成熟时采收。
9.1采收果实与取籽
采收按二次标记的杂交瓜，对果形不一、皮色不一、纹色不一、形状不一和不具备母本特性的果实以及有病、腐烂的果实和没标记或标记不清的瓜全部摘除，严防混杂。对与母本特征特性一致的杂交果实，统一采收、堆放、后熟、鉴别、破瓜取种。
9.2种子采集
将采摘的破瓜取种合格杂交果实堆放在田间阴凉处后熟10～15d，逐个破开，认真观察、鉴别每个果实剖面，对瓤色不一、种子大小、颜色以及形状不一的果实再次清理，严防混杂、变异的果实种子混入。鉴别后，将一致的杂交瓜剖瓜取出心室，经破碎使瓤籽分离后，筛去瓜瓤、选出种子。注意：掏瓜取种、消毒、晾晒等过程，操作所用器具必须是塑料或木竹瓷制品，严禁使用金属器具，以免污染种子表皮，影响种子外观色泽。
10种子药物消毒、晾晒
近年来，由于黄瓜绿斑驳花叶病毒病和细菌性果腐病的发生，在国内外瓜类行业引起极高地重视，目前我们研究出了新的种子药物消毒方法，效果很好。具体是用OxoniaActive和水按1：80配制消毒液，消毒液与湿种子的比例为3：1。将无杂质种子，用塑料纱网袋或直接倒入盛装消毒液的容器中浸泡15～20min，浸泡时要不停地搅动种子，使种子消毒充分，到时间后将种子捞出沥干，再放人10%的磷酸三纳药液中浸泡20min后取出放入甩干机中甩干晾晒。种子消毒液可重复使用1～2次，但必须在1h内操作才有效。种子消毒过程中，操作人员必须配戴眼镜、胶手套、围裙，防止药液飞溅到身体上，对人体造成危害。
晾晒种子要放置在用塑料纱网制作的木制筛上，距地面1m处。在炎热的晴天，晒2～3d，即可将种子晒至安全水分（达到国标规定8%以内）。种子干燥后将种子存放在麻袋、布袋或编织袋内，同时将每一包装袋内、外均放置标签牌，写明品种名称、袋号、户名、数量、制种年份、制种地点，以待交售。种子切勿放置在潮湿的环境中，以免吸潮变质。注意：晾晒种子时切勿放置在塑料膜、铁器制品和水泥地面上，防止高温爆晒将种胚烫死烧伤，从而致使种子丧失发芽能力。适宜的晾晒物是塑料纱网筛、竹筛、帆布等通气良好的物品。
11种子检验、人库
将晒干的种子分批进行抽样，按GB/T3543检测。将抽样后检测合格的种子按GB/T7414要求包装，用编织袋外袋、塑料薄膜内袋密封包装，每袋种子内、外附上标签，其上注明品种名称、净重、生产地点、制种年份、生产人员及每个环节的操作技术人员。然后按GB/T 7415要求贮藏。在低温冷藏库内贮藏，并分品种码堆，种子入库后随即对整个仓库进行消毒处理。杂交亲抗水瓜砧木种子质量：发芽率不低于90%，水分不高于8%，净度不低于99%，并经实验室病理检测种子上不携带黄瓜绿斑驳病毒病和细菌性果腐病病菌。
12种子干热杀菌
12.1对种子的要求
经检测种子携毒、携菌，当年或隔年的种子，种子发芽率在92%以上，籽粒饱满，水分含量8%以下。陈种经干热杀菌后丧失芽率严重。
12.2杀毒程序编程
采用程控编程，设置好预定的温度、湿度、时间，具体为：35℃、20%、16h；45℃、15%、16h；55℃、10%、16h；75℃、5%、72h；以后依次降温到35℃，增湿到20%m。把种子放入料盘中刮平，厚3cm，关好门可开机运行。整过杀毒灭菌程序完成自动关机，在机内停置24h再把种子取出装入布袋，布袋规格50cm×80cm。同时取样检测发芽率和病毒。
12.3种子活力修复
干热杀菌种子在高温低湿条件下运行时间长达几十个小时，种子失水严重。把装袋种子堆放在无菌无毒库房内常温常湿条件下1个月后，让细胞得以修复后，经芽率、病毒病菌检测合格的种子转入低温库贮存备用。
关键词：亲抗水瓜；杂交；砧木；健康种子；技术规程
1适用范围
为生产出不携带黄瓜绿斑驳花叶病毒病病原物、不携带细菌性果腐病病菌的杂交亲抗水瓜砧木健康种子，特制定本生产技术规程。本规程适用邵阳地区杂交亲抗水瓜砧木生产基地。
2规范性引用文件
GB16715.1瓜类作物种子·瓜类；GB/T3543.1-GB/T3543.7农作物种子检验规程；GB/T7414-GB/T7415主要农作物种子包装及贮藏。
3术语和定义
3.1亲抗水瓜
属葫芦科葫芦属瓠瓜种作物，该品种系湖南雪峰种业有限责任公司于20世纪80年代从日本引进的西瓜砧木专用品种，亲本经多年的提纯复壮，抗性和亲和力表现特别好。
3.2杂交制种
用父本雄花花粉给母本雌花授粉结实，得出具有杂交优势的亲抗水瓜杂交种子的过程。
3.3制种用亲本
制种所用亲本是用原种繁育一代、二代，质量达到GB 16715.1的亲本种子。制种用亲本只能用于杂交制种，不能用于繁殖。
3.4健康种子
是通过栽培管理、种子采收后药剂消毒、干热杀菌等一系列技术措施生产出来且不携带黄瓜绿斑驳花叶病毒病和细菌性果腐病病原的种子。
4生产管理
4.1制种田的选择
选择5～7a（年）未种过葫芦科、茄科、烟草等作物地块作为制种田。前茬适宜的作物是水稻等。制种田以肥沃、排灌方便、有机质含量高、pH值呈中性的土壤为宜。制种田周边要求1000m内不能种植其他水瓜品种或其他瓜类作物，确保水瓜制种纯度达标和无黄瓜绿斑驳花叶病毒病、细菌性果腐病的交叉感染。
4.2亲本种子的准备
杂交制种亲本种子必须符合GB16715.1质量标准，同时具备原品种（系）特征特性、纯度不低于99.7%、发芽率不低于90%的国家标准一级的亲本种子。父本和母本种子配备比例为1：10。
4.3整畦与育苗
按2m宽开畦，单行种植，畦沟宽0.25m，沟深0.20m。每667m2瓜沟施入m氮：m五氧化二磷：m氧化钾=15：15：15的三元复合肥40kg、钙镁磷肥50kg，肥料与土壤充分拌匀，瓜行整成龟背形，开好围沟、厢沟、腰沟，畦沟做到沟沟相通，制种田块雨后无渍水。在雨后瓜行土壤湿润时铺封好宽0.8m银灰色微膜，以利于避蚜虫，保水保肥，防止杂草滋生。南方地区在3月下旬至4月上旬育苗。父本播种要较母本播种提早7～10d，这样既保证父、母本花期相遇，也利于根据父本品种特征特性，拔除杂株，提高制种纯度。
4.4定植及植株调整
在苗龄15～20d，即1叶1心时定植为宜。定植株距依土壤肥力而定。父本定植地块与母本定植地块明显分开，株距1m，每穴1株，667m2定植333株。母本株距0.8m，每穴1株，667m2定植420株。移栽时在穴内放“一特片”1片，防苗期蚜虫。父本5叶期摘心、以后不整枝；母本3～4叶采用150mg·L-1乙烯利喷施叶面和生长点，可增加雌花量，5叶期摘心，在叶腋处留2条方向一致、粗壮的子蔓。在子蔓6～8片叶腋内留孙蔓作授粉坐果蔓。子蔓10片叶时摘心促生长。当母本雌花子房经过授粉后，果实长至碗口大时，瓜后留5片叶摘心。整枝应在晴天进行，以免伤口感染，诱发病害。操作时用医用酒精和10%磷酸三钠将手及用具进行擦洗，可杀灭病菌，防止传播病毒和细菌。
5杂交用具
目前亲抗水瓜杂交制种主要采用手工杂交，杂交的主要用具是24号细铁丝，将铁丝制成周长4cm左右的“U”环，用于卡花并做杂交标记。
6杂交的步骤与方法
6.1父本纯度鉴定
在授粉前1周，认真检查父本纯度，将株型不一、叶型不一、子房形态不一的杂株全部拔除，确保父本植株纯正，方可进行杂交授粉。
6.2卡花与采集花粉
卡花是为了防止自交和非目的性杂交。方法是将次日即将开放的母本雌花大花蕾（选择强壮的花蕾，并将第1雌花及将要开放的瘦小花蕾摘除），用细铁丝将花冠卡住，不讓其任意放开，以免在次日未授粉前由昆虫进行非目的性杂交或自交。每卡1朵花，在花蕾旁边的叶子上再插1枚细铁丝或颜色亮丽的毛线，以供在次日授粉结束后作杂交标记用。父本花粉的采集可以在开花前1d傍晚将次日杂交用的父本花蕾用细铁丝卡住，在杂交当天开花前带柄取下，插入清水中用于授粉；也可在开花前1d傍晚根据需要量将父本雄花的花蕾摘下，盛于容器中进行适当的干燥，次日授粉将花药集中于贮粉瓶中，用毛笔搅拌均匀成为混合花粉，供授粉用。
6.3授粉
一般以孙蔓3～4节位长出的雌花授粉为宜。授粉时取下雌花花冠上的细铁丝，剥开雄花花冠，用雄花花药上的花粉轻轻地、均匀涂抹在雌花的柱头四周，在柱头四周涂抹的花粉越多，制种产量就越高。一般1朵雄花授2～3朵雌花，也可用毛笔蘸上混合花粉涂于雌花柱头上。授粉结束后仍将原来的细铁丝卡住花冠，以防传粉昆虫进入花内授粉，降低杂交种种子纯度。同时，将花蕾旁边叶子上的备用细铁丝或毛线系于花柄上（不可系得太紧），以做杂交标记。授粉必须采用当天开放的雄花花粉。授粉工作一般在17：00-19：00进行。
7授粉后的管理 7.1选留果
亲抗水瓜的子房在杂交授粉后的3～4d迅速膨大，幼瓜长至拳头大时，表明该株果实已坐住，一般每株母本坐住2～3个授粉果，可停止授粉。授粉幼瓜坐果部位应尽可能一致。同时，随时检查，及时去掉烂果、病果、发育不良的果实。
7.2摘心、整枝、疏果
幼瓜长至碗口大小时，瓜后留5～6叶摘心。并将其他无效枝打掉；去除植株基部的老叶、病叶，以增强通风透光；摘除未授粉的花蕾和未杂交的果实，每隔几天进行1次。这一措施既可以防止未杂交花朵的结果，也有利于使植株的养分充分供应到杂交果实上，促进种瓜成熟，提高种子的饱满度。
7.3清理父本
杂交亲抗水瓜制种田母本授粉工作结束后，要立即将整个田区的父本全部铲除干净，严禁父本植株坐果留种，确保育种者的合法权益。
7.4对杂交授粉果实作第2次标记
在采收前10d，认真检查杂交授粉果实，对果实上有授粉标记的，再用油漆或记号笔在杂交果实上作二次标记，再次确认是人工杂交授粉的果实。对未有记号標记的“自交果”，或标记不清楚的果实严格摘除，并连同瓜秧一起拔除，确保田区内没有“自交果”。
8病虫害防治
亲抗水瓜砧木制种期间主要病虫害有黄守瓜、蚜虫、蓟马、白粉病、炭疽病等。农业防治可采取水旱轮作，高畦定植，石灰水消毒等农艺措施；药剂防治虫害：黄守瓜幼虫用90%敌百虫乳油1500倍液，成虫用20%氰戊菊酯乳油2000倍液喷雾；防蚜虫和蓟马用10%吡虫啉可湿性粉剂2000倍液喷雾防治；白粉病用15%粉锈宁可湿性粉剂1500倍液或50%硫磺悬浮液500倍液喷雾。炭疽病发病初期用40%炭疽福美400倍液喷雾，发病中后期可用50%甲霜灵500倍液喷雾。
9种子采收
授粉后55～60d，果实已经成熟，果实内的种子达到生理和形态完全成熟时采收。
9.1采收果实与取籽
采收按二次标记的杂交瓜，对果形不一、皮色不一、纹色不一、形状不一和不具备母本特性的果实以及有病、腐烂的果实和没标记或标记不清的瓜全部摘除，严防混杂。对与母本特征特性一致的杂交果实，统一采收、堆放、后熟、鉴别、破瓜取种。
9.2种子采集
将采摘的破瓜取种合格杂交果实堆放在田间阴凉处后熟10～15d，逐个破开，认真观察、鉴别每个果实剖面，对瓤色不一、种子大小、颜色以及形状不一的果实再次清理，严防混杂、变异的果实种子混入。鉴别后，将一致的杂交瓜剖瓜取出心室，经破碎使瓤籽分离后，筛去瓜瓤、选出种子。注意：掏瓜取种、消毒、晾晒等过程，操作所用器具必须是塑料或木竹瓷制品，严禁使用金属器具，以免污染种子表皮，影响种子外观色泽。
10种子药物消毒、晾晒
近年来，由于黄瓜绿斑驳花叶病毒病和细菌性果腐病的发生，在国内外瓜类行业引起极高地重视，目前我们研究出了新的种子药物消毒方法，效果很好。具体是用OxoniaActive和水按1：80配制消毒液，消毒液与湿种子的比例为3：1。将无杂质种子，用塑料纱网袋或直接倒入盛装消毒液的容器中浸泡15～20min，浸泡时要不停地搅动种子，使种子消毒充分，到时间后将种子捞出沥干，再放人10%的磷酸三纳药液中浸泡20min后取出放入甩干机中甩干晾晒。种子消毒液可重复使用1～2次，但必须在1h内操作才有效。种子消毒过程中，操作人员必须配戴眼镜、胶手套、围裙，防止药液飞溅到身体上，对人体造成危害。
晾晒种子要放置在用塑料纱网制作的木制筛上，距地面1m处。在炎热的晴天，晒2～3d，即可将种子晒至安全水分（达到国标规定8%以内）。种子干燥后将种子存放在麻袋、布袋或编织袋内，同时将每一包装袋内、外均放置标签牌，写明品种名称、袋号、户名、数量、制种年份、制种地点，以待交售。种子切勿放置在潮湿的环境中，以免吸潮变质。注意：晾晒种子时切勿放置在塑料膜、铁器制品和水泥地面上，防止高温爆晒将种胚烫死烧伤，从而致使种子丧失发芽能力。适宜的晾晒物是塑料纱网筛、竹筛、帆布等通气良好的物品。
11种子检验、人库
将晒干的种子分批进行抽样，按GB/T3543检测。将抽样后检测合格的种子按GB/T7414要求包装，用编织袋外袋、塑料薄膜内袋密封包装，每袋种子内、外附上标签，其上注明品种名称、净重、生产地点、制种年份、生产人员及每个环节的操作技术人员。然后按GB/T 7415要求贮藏。在低温冷藏库内贮藏，并分品种码堆，种子入库后随即对整个仓库进行消毒处理。杂交亲抗水瓜砧木种子质量：发芽率不低于90%，水分不高于8%，净度不低于99%，并经实验室病理检测种子上不携带黄瓜绿斑驳病毒病和细菌性果腐病病菌。
12种子干热杀菌
12.1对种子的要求
经检测种子携毒、携菌，当年或隔年的种子，种子发芽率在92%以上，籽粒饱满，水分含量8%以下。陈种经干热杀菌后丧失芽率严重。
12.2杀毒程序编程
采用程控编程，设置好预定的温度、湿度、时间，具体为：35℃、20%、16h；45℃、15%、16h；55℃、10%、16h；75℃、5%、72h；以后依次降温到35℃，增湿到20%m。把种子放入料盘中刮平，厚3cm，关好门可开机运行。整过杀毒灭菌程序完成自动关机，在机内停置24h再把种子取出装入布袋，布袋规格50cm×80cm。同时取样检测发芽率和病毒。
12.3种子活力修复
干热杀菌种子在高温低湿条件下运行时间长达几十个小时，种子失水严重。把装袋种子堆放在无菌无毒库房内常温常湿条件下1个月后，让细胞得以修复后，经芽率、病毒病菌检测合格的种子转入低温库贮存备用。