高效化学转化菌内同源重组法构建重组腺病毒

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【摘要】

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目的:对细菌内同源重组法构建重组腺病毒AdEasy系统加以改进,为制备具有更高抗肿瘤疗效的生物治疗制剂奠定基础.方法:将自杀基因CD和HSV-TK插入穿梭质粒pAdTrack-CMV中,PmeⅠ

【作者】

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尹冰楠李冬田李秋香佟惠春李光明

【机构】

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300070

【出处】

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天津医药

【发表日期】

：

2005年7期

【关键词】

：

重组腺病毒细菌内同源重组法 AdEasy系统化学转化法高效生物治疗制剂融合自杀基因穿梭质粒 293细胞脂质体介导肿瘤疗效基因CD 氯仿抽提乙

【基金项目】

：

天津市卫生局资助项目

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目的:对细菌内同源重组法构建重组腺病毒AdEasy系统加以改进,为制备具有更高抗肿瘤疗效的生物治疗制剂奠定基础.方法:将自杀基因CD和HSV-TK插入穿梭质粒pAdTrack-CMV中,PmeⅠ酶切后,用酚:氯仿抽提、乙醇沉淀或切胶回收纯化;分别采用电穿孔转化法和化学转化法将线性穿梭质粒(pAdTrackCMV-CDglyTK)与腺病毒骨架质粒pAdEasy-1在细菌内实现同源重组;将重组腺病毒质粒rpAdEasyGFP-CDglyTK以脂质体介导至293细胞中进行包装、扩增.结果:采用切胶回收化学转化法

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