【摘 要】
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目的:建立全自动二维色谱法(2D-HPLC)结合拦截技术测定人血清中奈韦拉平浓度的方法.方法:样品采用高氯酸沉淀蛋白直接进样的方法,用二维高效液相色谱法在线固相萃取并分析测
【机 构】
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成都医学院药学院 成都610500;成都医学院第一附属医院药学部 成都610500
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目的:建立全自动二维色谱法(2D-HPLC)结合拦截技术测定人血清中奈韦拉平浓度的方法.方法:样品采用高氯酸沉淀蛋白直接进样的方法,用二维高效液相色谱法在线固相萃取并分析测定.第一维色谱柱为Aston SC2柱(25 mm×3.5 mm,5μm);流动相为甲醇-0.06 mol·L-1三乙胺(调pH=6.9)(23:77,v/v);流速:1.0 ml·min-1;第二维色谱柱为Aston SN(100 mm×4.6 mm,5μm);流动相为甲醇-0.04 mol·L-1磷酸二氢钾(磷酸调pH=3.0)(45:55,v/v);流速:1.2 ml·min-1;中间柱为Aston SCX MC2(3.0 mm×10 mm,5μm);检测波长:281 nm;柱温:40℃;进样量:200μl.结果:奈韦拉平在0.1～10.0μg·ml-1内与峰面积线性关系良好,r=0.9999,最低定量限(LOQ)为0.1μg·ml-1,绝对回收率为92.51％ ～94.94％(RSD=1.6％,n=5),日内、日间RSD分别为1.51％ ～1.89％和1.52％ ～1.92％(n=5).结论:该方法快速、简便、准确、重复性好,适用于临床上奈韦拉平的血药浓度检测.
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