鹅细小病毒VP2基因在大肠杆菌中的表达及纯化

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将鹅细小病毒(GPV)VP2基因插入原核表达载体pPROEX-HTb,获得重组表达质粒pPROEX-HTb-VP2.将其转化大肠杆菌DH5α,用IPTG诱导表达,表达菌体蛋白中可产生与预期大小相符的约72 000的蛋白.以光密度扫描对该表达产物进行定量分析,表达产物约占菌体总蛋白的14%.经His-tag金属螯合层析纯化,获得纯度较高的6His-VP2融合蛋白.Western-blot结果表明,所得蛋白与鹅抗GPV高免血清有较好的免疫反应性,说明在VP2的N端融合6个组氨酸不影响其与特异抗体结合的活性.
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