探讨维生素D₃对严重烧伤小鼠肠黏膜屏障的作用。

将42只C57BL/6C雄性8～12周龄小鼠按随机数字表法分为维生素D₃溶剂＋假伤组7只、维生素D₃溶剂＋烧伤组14只、维生素D₃＋假伤组7只、维生素D₃＋烧伤组14只。维生素D₃溶剂＋假伤组及维生素D₃溶剂＋烧伤组小鼠实验前1、24、48 h腹腔注射0.1 mL维生素D₃溶剂，维生素D₃＋假伤组和维生素D₃＋烧伤组小鼠于相同时间点腹腔注射将按100 ng/kg计算的维生素D₃溶于0.1 mL维生素D₃溶剂中配制的维生素D₃溶液。维生素D₃溶剂＋烧伤组及维生素D₃＋烧伤组小鼠背部浸于98 ℃热水中3～4 s致30%体表总面积Ⅲ度烫伤(以下称烧伤)。维生素D₃溶剂＋假伤组及维生素D₃＋假伤组小鼠背部浸于37 ℃温水中3～4 s致假伤。伤后24 h，取7只维生素D₃溶剂＋假伤组、7只维生素D₃＋假伤组小鼠断颈处死；伤后6、24 h，分别取7只维生素D₃溶剂＋烧伤组、7只维生素D₃＋烧伤组小鼠断颈处死，取肝脏、脾脏、肠系膜淋巴结及肠组织。取各组小鼠肝脏、脾脏、肠系膜淋巴结，观察细菌生长情况，并行细菌计数。取各组小鼠肠组织，采用免疫组织化学法检测带状闭合蛋白1(ZO－1)及咬合蛋白的表达，免疫荧光法检测ZO－1分布，蛋白质印迹法检测咬合蛋白的表达。对数据行Kruskal－Wallis H检验、Nemenyi检验、单因素方差分析、t检验及Bonferroni校正。

(1)伤后6、24 h，维生素D₃溶剂＋烧伤组小鼠肠系膜淋巴结、肝脏、脾脏细菌载量显著高于维生素D₃溶剂＋假伤组(P<0.05)。伤后6 h，维生素D₃＋烧伤组小鼠肝脏、脾脏的细菌载量明显低于维生素D₃溶剂＋烧伤组(P<0.05)。伤后24 h，维生素D₃＋烧伤组小鼠肠系膜淋巴结、肝脏细菌载量明显低于维生素D₃溶剂＋烧伤组(P<0.05)。(2)伤后6、24 h，维生素D₃溶剂＋烧伤组小鼠肠组织ZO－1及咬合蛋白表达明显低于维生素D₃溶剂＋假伤组，维生素D₃＋烧伤组小鼠肠组织ZO－1及咬合蛋白表达与维生素D₃＋假伤组相近。伤后6、24 h，维生素D₃＋烧伤组小鼠肠组织ZO－1及咬合蛋白表达明显高于维生素D₃溶剂＋烧伤组。(3)伤后6、24 h，与维生素D₃溶剂＋假伤组相比，维生素D₃溶剂＋烧伤组小鼠肠黏膜上皮ZO－1分布不连续；维生素D₃＋假伤组小鼠肠黏膜上皮ZO－1分布正常，维生素D₃＋烧伤组小鼠肠黏膜上皮ZO－1分布连续性良好。(4)维生素D₃溶剂＋烧伤组小鼠伤后6、24 h肠组织咬合蛋白表达分别为0.720±0.003、0.638±0.052，显著低于维生素D₃溶剂＋假伤组的0.918±0.003(t＝57.33、5.36，P<0.05)；维生素D₃ ＋烧伤组小鼠伤后6、24 h肠组织咬合蛋白表达为0.994±0.058、1.064±0.060，与维生素D₃ ＋假伤组的0.938±0.023相近(t＝0.91、1.96，P>0.05)。维生素D₃溶剂＋烧伤组小鼠伤后6、24 h肠组织咬合蛋白表达明显低于维生素D₃ ＋烧伤组(t＝4.75、5.35，P<0.05)。

严重烧伤早期小鼠即可发生肠道细菌移位，而维生素D₃可通过保护肠上皮紧密连接蛋白，从而起到保护肠黏膜屏障，减少肠道细菌移位的作用。