比格犬雌激素受体β的原核表达、纯化及鉴定

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目的研究比格犬雌激素受体β(Estrogenreceptorβ,ERβ)及其剪接异构体在生殖调控中的功能,构建比格犬ERβ的pMAL-p5x/ERβ 480DE3E.coli重组菌株,并进行纯化和鉴定。方法Trizol法提取发情期比格犬下丘脑总RNA,RT-PCR获得cDNA,以NCBI网站公布的比格犬ERβ基因CDS序列设计特异性引物,扩增ERβ保守区基因编码序列(16-496bp),连接原核表达载体pMAL-p5x,筛选、鉴定阳性克隆并测序。将重组质粒转化至大肠杆菌DH5α,再转化大肠杆菌BL21(D
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