pIRES-PML-RARα-hIL-2重组质粒的构建和表达研究

来源 :癌症进展 | 被引量 : 0次 | 上传用户：smuwenwen

【摘要】

：

目的构建PML-RARα融合基因与人白介素-2（hIL-2）基因真核双表达质粒。方法利用RT-PCR技术从NB4细胞的RNA中扩增出PML-RARα融合点附近的部分基因片段，通过RT-PCR扩增Jurkat细胞

【作者】

：

胡刚李扬秋周竝陈少华杨力建岑东芝

【机构】

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暨南大学医学院血液病研究所,广东省惠东县人民医院内一科,暨南大学再生医学教育部重点实验室,暨南大学医学院生化教研室

【出处】

：

癌症进展

【发表日期】

：

2008年4期

【关键词】

：

PML-RARΑ HIL-2 急性早幼粒细胞白血病 DNA疫苗 PML- RARα hIL- 2 APL DNA vaccine

【基金项目】

：

中德生物技术合作项目（CHN02/319）、广东省科技计划项目（2005850301016）,广州市科技攻关计划（2003J1-10011.2005Z1-FA011）和国务院侨办重点学科建设基金资助

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目的构建PML-RARα融合基因与人白介素-2（hIL-2）基因真核双表达质粒。方法利用RT-PCR技术从NB4细胞的RNA中扩增出PML-RARα融合点附近的部分基因片段，通过RT-PCR扩增Jurkat细胞中的hIL-2基因，并分别将两基因片段连接到pIRES质粒的多克隆位点（MCS）A和B中，构建真核双表达质粒。利用酶切和序列分析方法验证所构建质粒的正确性。将构建成功的重组质粒转染A549细胞，通过RT-PCR检测重组质粒在真核细胞中的转录情况，利用点杂交、ELISA检测目的蛋白的表达情况。结果Nh

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