【摘 要】
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目的 探索麻杏石甘汤通过影响肺组织糖酵解而治疗病毒性肺炎的作用机制。方法 通过鼻腔接种法建立甲型H1N1流感病毒株A/PR/8/34感染小鼠模型,给药6天后,计算小鼠体质量变化、肺指数和肺指数抑制率,苏木素—伊红(hemotaxylin-eosin staining, HE)染色观察肺组织病理变化;生化检测小鼠肺组织糖酵解代谢物丙酮酸、乳酸的含量,以及糖酵解关键酶己糖激酶(hexokinase,
【基金项目】
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国家中医药管理局中医药创新团队及人才支持计划(ZYYCXTD-C-202006); 国家自然科学基金(82104567); 北京中医药大学揭榜挂帅课题(2022-JYB-JBZR-030);
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目的 探索麻杏石甘汤通过影响肺组织糖酵解而治疗病毒性肺炎的作用机制。方法 通过鼻腔接种法建立甲型H1N1流感病毒株A/PR/8/34感染小鼠模型,给药6天后,计算小鼠体质量变化、肺指数和肺指数抑制率,苏木素—伊红(hemotaxylin-eosin staining, HE)染色观察肺组织病理变化;生化检测小鼠肺组织糖酵解代谢物丙酮酸、乳酸的含量,以及糖酵解关键酶己糖激酶(hexokinase, HK)、乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase, LDH)的活性;ELISA法检测小鼠肺组织炎症因子肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor alpha, TNF-α)、白细胞介素-1β(interleukin 1 Beta, IL-1β),以及抑炎因子白细胞介素-10(interleukin 10,IL-10)的变化;免疫蛋白印迹法检测肺组织中葡萄糖转运蛋白1(glucose transporter 1,GLUT1)、调控糖酵解关键因子缺氧诱导因子-1α(hypoxia inducible factor 1-Alpha, HIF-1α)、促炎巨噬细胞标记物白细胞分化抗原80(cluster of differentiation 80,CD80),以及抑炎巨噬细胞标记物白细胞分化抗原206(cluster of differentiation 206,CD206)的表达变化。结果 给药6天后,与正常组相比,模型组体重明显降低(P<0.01)、肺指数显著升高(P<0.01),肺部炎性细胞浸润明显,肺组织糖酵解代谢产物丙酮酸与乳酸的含量明显升高(P<0.01)、糖酵解关键酶己糖激酶、乳酸脱氢酶的活性增强(P<0.01),肺组织炎症因子TNF-α、IL-1β水平升高(P<0.01)、抑炎因子IL-10水平降低(P<0.01),葡萄糖转运蛋白GLUT1表达降低(P<0.01)、调控糖酵解关键因子HIF-1α及促炎巨噬细胞标记物CD80呈现高表达(P<0.01),抑炎巨噬细胞标记物CD206表达减少(P<0.01)。麻杏石甘汤、奥司他韦、2-脱氧葡萄糖(2-Deoxy-D-Glucose, 2DG)对以上结果均有不同程度干预。结论 麻杏石甘汤可能通过抑制肺组织糖酵解过程以及糖酵解驱动的促炎巨噬细胞活化,从而抑制肺组织过度炎症反应,减轻病毒性肺炎肺损伤。
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