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摘要 对一起临床诊断疑似猪繁殖与呼吸综合征(蓝耳病)的病例进行实验室诊断。采集发病保育猪病料进行分子生物学诊断和血液染色镜检,最终被确诊为猪附红细胞体病而排除蓝耳病感染。经过对症治疗,成功控制了死亡率。该病例反映出基层兽医普遍存在一个误区,即只要猪耳朵发绀、皮肤发红就怀疑是蓝耳病,如果诊断结果是别的病就不能接受;猪附红细胞体病作为老病和二类传染病不被重视,这对养猪业的健康发展是相当不利的。
关键词 猪附红细胞体
猪附红细胞体病是一种溶血性疾病,多为附红细胞体寄生于猪血浆中或者红细胞表面而引发[1]。近些年来,该病在我国各地流行泛滥,已经连续多年给养猪业收益带来极大影响,造成巨大经济损失[2]。
根据中国期刊网对相关文献收录统计情况,发现近几年来该病相关文献数量呈暴发式增长,1979—1993年之间收录该病相关文献仅为数例,1994—2000年之间文献报道数量为54篇,而2001—2015年之间相关文献多达2 133篇。其范围几乎遍及全国各地,大多描述了该病预防、诊断及治疗相关问题,通过上述数据,可以充分表明该病具备发病多、范围广的特征[3]。2015年11月江苏省农科院动物疫病诊断检测中心接诊了一起基层兽医临床诊断为保育猪蓝耳病而经实验室确诊为附红细胞体病的病例,现将诊治过程报告如下。
1 案例概述
该案例发生于2015年冬季(11月),江苏省泰州市某规模化养猪场共有存栏生产母猪300头,其中200余头为50~60日龄的保育猪,由于供暖设施突然出现故障,致使该栋仔猪出现耳朵、腹下、四肢皮肤发紫,被毛粗乱,眼睛周围呈青紫色,腹部皮下有蓝紫色淤血点,体温升高至40~42 ℃,发病率约60%,被本猪场兽医诊断为猪蓝耳病,用氨基比林、头孢噻呋、阿米卡星等进行肌肉注射,但治疗后基本没有什么效果,在短短2 d内便有11头死亡,随后该养殖场将1头发病活猪请求进行检测、确诊。
2 剖检情况
主要病变:血液呈酱油色、凝固不良;心包积液,心肌苍白松弛;肝脏黄棕色;胆囊膨胀,充满浓稠明胶样胆汁;脾脏呈暗黑色;肺轻度水肿,有出血点;肾脏肿大,颜色呈轻度土黄色;其余器官无肉眼可见的病理变化。
3 实验室诊断
诊断单位为江苏省农科院兽医所动物疫病诊断检测中心,诊断时间为2015年12月。
3.1 分子生物学诊断
分子生物学诊断应在无菌环境下进行,具体步骤如下:首先,取用发病猪的脑、脾脏、肺脏和淋巴结作为检测样本,随后,经过研磨与冻融处理并进行PCR检测,通过提取、扩增RNA和DNA并经琼脂糖电泳,最后检测猪蓝耳病病毒、猪伪狂犬病毒、猪瘟病毒,以及猪圆环病毒2型。经过上述诊断后,结果均为阴性。
3.2 新鲜血液检查
通过新鲜血液的检查来进行诊断,在无菌环境下静脉取用1滴鲜血,放入等量的生理盐水中混合均匀,通过在600倍显微镜下加盖玻片观察,发现血浆中红细胞周围存在形态各异的附红细胞体,且红细胞呈现不规则多边形或星型。
3.3 血涂片染色
通过用瑞士染色血涂片的方式,并在油镜下检查,结果发现很多红细胞表面出现变形,且血浆中存在形态各异的菌体,菌体呈现紫蓝色,且折光性较强。
3.4 细菌分离培养
在无菌环境下,取用病猪肝脏组织接种在绵羊血琼脂平板上进行培养,培养时长24 h,温度控制在37 ℃恒温,结果未在培养基上发现有细菌生长。
通过上述一系列的检查,结合各检查结果,将该病确诊为猪附红细胞体病。
4 治疗
针对该病,给出了如下治疗建议,并取得了良好成效。首先,提高猪舍内的温度。通过在猪舍内摆放10盏250 W的红外灯,进而有效提高猪舍温度,提高病猪肤感温度。其次,及时在饲料中添加药物进行治疗。通过在1 t饲料中添加阿散酸250 g,以及500 g高质量的电解多维、黄芪多糖以及葡萄糖,连续添加7 d左右。最后,对于发病严重的病猪进行肌肉注射治疗。药物选用三氮脒,用量以6 mg/kg为宜,注射后48 h进行第2次注射。
经过上述治疗后,病情明显好转,除了发病尤其严重的4头病死外,再无病猪恶化死亡,且均逐渐恢复到正常状态。
5 反思
首先,近年来,由于蓝耳病的流行,只要猪出现耳朵发绀,皮肤发红,基层兽医大多诊断为猪蓝耳病,这种诊断惯性容易被认可,如果诊断结果是其他病,可能难以接受,致使猪附红细胞体病作为老病和二类传染病被掩盖,这对基层养猪业的健康发展是相当不利的。
其次,传统理论认为猪附红细胞体病主要发生于通过
蚊虫血源性传播的夏季,也是造成误诊的另一重要原因。猪附红细胞体是一种典型的条件致病性微生物,该病的发生也存在多种诱因,比如天气寒冷、长途运输,以及不合格的疫苗注射等都可能诱发该病。近期江苏省农科院动物疫病诊断检测中心临床门诊部接诊了一起保育猪由于不规范的疫苗注射(冬季注射口蹄疫疫苗时,疫苗未回温)而暴发该病的案例。
再次,猪附红细胞体病极易导致贫血问题,但猪体感染此病后,其红细胞膜抗原会因附红细胞体而发生改变,被免疫系统所排斥,进而出现自身免疫性溶血[3]。因此,在发生该病情的时候,应当及时补充发病猪的多维、糖分等来防治低血糖或酸中毒,同时应当尽量改善猪舍环境,为病猪的康复营造良好条件。
最后,虽然目前对于治疗该病的药物多种多样,但还没有完全能够消除虫体的特效药,对于病情较为严重的几乎还是无药可救[4]。因此,一旦发病,应当及时诊断、治疗。
6 参考文献
[1] 刘玲芳,袁增歧,张淑霞.附红细胞体病病原学研究概况[J].动物医学进展袁,2013(3):31-34.
[2] 李辉,刘聚详,刘静,等.抗猪附红细胞体药物体内筛选模型的建立与应用[J].华北农学报,2010,25(增刊1):290-294.
[3] 贾杏林.猪附红细胞体分子诊断与致病机理的研究[D].北京:中国农业大学,2005:13-40.
[4] 薛书江.猪附红细胞体吉林株单克隆抗体的制备应用和免疫蛋白组学研究[D].延吉:延边大学,2014.
关键词 猪附红细胞体
猪附红细胞体病是一种溶血性疾病,多为附红细胞体寄生于猪血浆中或者红细胞表面而引发[1]。近些年来,该病在我国各地流行泛滥,已经连续多年给养猪业收益带来极大影响,造成巨大经济损失[2]。
根据中国期刊网对相关文献收录统计情况,发现近几年来该病相关文献数量呈暴发式增长,1979—1993年之间收录该病相关文献仅为数例,1994—2000年之间文献报道数量为54篇,而2001—2015年之间相关文献多达2 133篇。其范围几乎遍及全国各地,大多描述了该病预防、诊断及治疗相关问题,通过上述数据,可以充分表明该病具备发病多、范围广的特征[3]。2015年11月江苏省农科院动物疫病诊断检测中心接诊了一起基层兽医临床诊断为保育猪蓝耳病而经实验室确诊为附红细胞体病的病例,现将诊治过程报告如下。
1 案例概述
该案例发生于2015年冬季(11月),江苏省泰州市某规模化养猪场共有存栏生产母猪300头,其中200余头为50~60日龄的保育猪,由于供暖设施突然出现故障,致使该栋仔猪出现耳朵、腹下、四肢皮肤发紫,被毛粗乱,眼睛周围呈青紫色,腹部皮下有蓝紫色淤血点,体温升高至40~42 ℃,发病率约60%,被本猪场兽医诊断为猪蓝耳病,用氨基比林、头孢噻呋、阿米卡星等进行肌肉注射,但治疗后基本没有什么效果,在短短2 d内便有11头死亡,随后该养殖场将1头发病活猪请求进行检测、确诊。
2 剖检情况
主要病变:血液呈酱油色、凝固不良;心包积液,心肌苍白松弛;肝脏黄棕色;胆囊膨胀,充满浓稠明胶样胆汁;脾脏呈暗黑色;肺轻度水肿,有出血点;肾脏肿大,颜色呈轻度土黄色;其余器官无肉眼可见的病理变化。
3 实验室诊断
诊断单位为江苏省农科院兽医所动物疫病诊断检测中心,诊断时间为2015年12月。
3.1 分子生物学诊断
分子生物学诊断应在无菌环境下进行,具体步骤如下:首先,取用发病猪的脑、脾脏、肺脏和淋巴结作为检测样本,随后,经过研磨与冻融处理并进行PCR检测,通过提取、扩增RNA和DNA并经琼脂糖电泳,最后检测猪蓝耳病病毒、猪伪狂犬病毒、猪瘟病毒,以及猪圆环病毒2型。经过上述诊断后,结果均为阴性。
3.2 新鲜血液检查
通过新鲜血液的检查来进行诊断,在无菌环境下静脉取用1滴鲜血,放入等量的生理盐水中混合均匀,通过在600倍显微镜下加盖玻片观察,发现血浆中红细胞周围存在形态各异的附红细胞体,且红细胞呈现不规则多边形或星型。
3.3 血涂片染色
通过用瑞士染色血涂片的方式,并在油镜下检查,结果发现很多红细胞表面出现变形,且血浆中存在形态各异的菌体,菌体呈现紫蓝色,且折光性较强。
3.4 细菌分离培养
在无菌环境下,取用病猪肝脏组织接种在绵羊血琼脂平板上进行培养,培养时长24 h,温度控制在37 ℃恒温,结果未在培养基上发现有细菌生长。
通过上述一系列的检查,结合各检查结果,将该病确诊为猪附红细胞体病。
4 治疗
针对该病,给出了如下治疗建议,并取得了良好成效。首先,提高猪舍内的温度。通过在猪舍内摆放10盏250 W的红外灯,进而有效提高猪舍温度,提高病猪肤感温度。其次,及时在饲料中添加药物进行治疗。通过在1 t饲料中添加阿散酸250 g,以及500 g高质量的电解多维、黄芪多糖以及葡萄糖,连续添加7 d左右。最后,对于发病严重的病猪进行肌肉注射治疗。药物选用三氮脒,用量以6 mg/kg为宜,注射后48 h进行第2次注射。
经过上述治疗后,病情明显好转,除了发病尤其严重的4头病死外,再无病猪恶化死亡,且均逐渐恢复到正常状态。
5 反思
首先,近年来,由于蓝耳病的流行,只要猪出现耳朵发绀,皮肤发红,基层兽医大多诊断为猪蓝耳病,这种诊断惯性容易被认可,如果诊断结果是其他病,可能难以接受,致使猪附红细胞体病作为老病和二类传染病被掩盖,这对基层养猪业的健康发展是相当不利的。
其次,传统理论认为猪附红细胞体病主要发生于通过
蚊虫血源性传播的夏季,也是造成误诊的另一重要原因。猪附红细胞体是一种典型的条件致病性微生物,该病的发生也存在多种诱因,比如天气寒冷、长途运输,以及不合格的疫苗注射等都可能诱发该病。近期江苏省农科院动物疫病诊断检测中心临床门诊部接诊了一起保育猪由于不规范的疫苗注射(冬季注射口蹄疫疫苗时,疫苗未回温)而暴发该病的案例。
再次,猪附红细胞体病极易导致贫血问题,但猪体感染此病后,其红细胞膜抗原会因附红细胞体而发生改变,被免疫系统所排斥,进而出现自身免疫性溶血[3]。因此,在发生该病情的时候,应当及时补充发病猪的多维、糖分等来防治低血糖或酸中毒,同时应当尽量改善猪舍环境,为病猪的康复营造良好条件。
最后,虽然目前对于治疗该病的药物多种多样,但还没有完全能够消除虫体的特效药,对于病情较为严重的几乎还是无药可救[4]。因此,一旦发病,应当及时诊断、治疗。
6 参考文献
[1] 刘玲芳,袁增歧,张淑霞.附红细胞体病病原学研究概况[J].动物医学进展袁,2013(3):31-34.
[2] 李辉,刘聚详,刘静,等.抗猪附红细胞体药物体内筛选模型的建立与应用[J].华北农学报,2010,25(增刊1):290-294.
[3] 贾杏林.猪附红细胞体分子诊断与致病机理的研究[D].北京:中国农业大学,2005:13-40.
[4] 薛书江.猪附红细胞体吉林株单克隆抗体的制备应用和免疫蛋白组学研究[D].延吉:延边大学,2014.