ICAM-1基因转染对小鼠间充质干细胞成脂分化功能的影响

来源 :中华血液学杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:lovewxb1982
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目的 探讨细胞间黏附分子1(ICAM-1)基因转染对小鼠间充质干细胞(MSC)向脂肪细胞分化的影响.方法 构建含小鼠ICAM-1基因全长DNA片段的MIGR1-ICAM-1重组逆转录病毒质粒,连同空质粒MIGR1及包装质粒ECOS分别转染T293细胞,收集相关病毒上清并感染小鼠MSC细胞系C3H10T 1/2细胞,荧光倒置显微镜下观察及real-time PCR法和流式细胞术检测转染效率,将获得稳定过表达ICAM-1的C3H10T 1/2细胞(C3H10T 1/2-ICAM-1细胞)和转入空质粒的C3H10T 1/2细胞(C3H10T 1/2-MIGR1细胞)向脂肪细胞诱导分化,以原位油红O染色和real-time PCR检测成脂分化能力及其关键转录因子C/EBPα和PPARγ mRNA的表达水平.结果 成功构建MIGR1-ICAM-1逆转录病毒载体;感染C3H10T 1/2细胞获得稳定过表达ICAM-1的C3H10T 1/2-ICAM-1细胞和空载体对照C3H10T 1/2-MIGR1细胞.成脂细胞诱导分化结果显示,无论是在自分化还是诱导分化组中,C3H10T 1/2-ICAM-1细胞与转染空载体的细胞相比脂滴变小,其脂肪细胞数量分别为[(3.2±0.5)/孔、(12.2±3.8)/孔],显著少于转染空载体的细胞[(11.2±0.4)/孔、(51.3±2.8)/孔](P<0.05);C3H10T 1/2-ICAM-1细胞自分化组和诱导分化组C/EBPα mRNA表达水平分别为1.2±0.7和2.9±0.9);PPARγ mRNA表达水平分别为1557.6±70.2和7547.0±442.2,均较转染空载体细胞的5.8±0.5和23.0±2.3;2453.0±215.6和9856.3±542.2下调(P<0.05).结论 细胞表面ICAM-1过表达可抑制小鼠MSC的成脂分化。

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